Hep-70.4

Hep-70.4 hepatoma hücre hattı bir fare karaciğer tümöründen, özellikle de C57BL/6J fare suşundan türetilmiştir. Bu hücre hattı, in vitro çoğaltma sırasında farklı pasajlarda tanımlanan p53 genindeki mutasyonlarıyla dikkat çekmektedir. Pasaj sayısı 8'de, tek sarmal konformasyon polimorfizmi (SSCP) analizinde bir p53 mutasyonunun varlığını gösteren zayıf bir ek sinyal tespit edilmiştir. 38 numaralı pasajda, iki farklı p53 nokta mutasyonu tanımlanmıştır: kodon 135'te G:C'den C:G'ye dönüşüm ve ekzon 5'in kodon 138'inde C:G'den G:C'ye dönüşüm. Bu mutasyonlar sırasıyla alaninden proline ve sisteinden triptofana amino asit değişikliklerine yol açmıştır.

Hep-70.4 hücre hattı, yayılımı sırasında önemli ölçüde değişen morfolojik bir fenotip sergilemektedir. Bazı alt hatlar epitelyal bir morfoloji sergilerken, diğerleri fibroblast benzeri bir görünüm sergiler. Bu heterojenlik, hücre hattının karmaşık yapısını ve farklı kültür koşulları altındaki adaptasyon kabiliyetini yansıtmaktadır. Erken pasajlarda hem normal hem de mutasyona uğramış p53 alellerinin varlığı, mutasyonların seçici bir büyüme avantajı sağladığını ve zamanla mutasyona uğramış klonların baskın hale gelmesine yol açtığını düşündürmektedir.

Hep-70.4 hücre hattının ara filament protein analizi, normal karaciğer hücreleri için tipik olan basit keratin K8 ve K18'in yanı sıra vimentin ve keratin K19'un değişen derecelerde ifade edildiğini ortaya koymuştur. Bu protein modelleri hücre hattının hepatositik kökenini ve hepatoma hattı olarak sınıflandırılmasını doğrulamaktadır. Hep-70.4'ün genomik stabilitesi DNA parmak izi analizi ile de değerlendirilmiş ve artan pasaj sayıları ile belirli bantların göreceli yoğunluklarında değişiklikler gözlenmesine rağmen herhangi bir önemli yapısal anormallik ortaya çıkmamıştır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın