Hep-70.4

Garis sel hepatoma Hep-70.4 berasal dari tumor hati tikus, khususnya dari galur tikus C57BL/6J. Garis sel ini terkenal karena mutasinya pada gen p53, yang diidentifikasi pada bagian yang berbeda selama perbanyakan in vitro. Pada bagian nomor 8, sinyal tambahan yang lemah terdeteksi dalam analisis polimorfisme konformasi untai tunggal (SSCP), yang menunjukkan adanya mutasi p53. Pada bagian nomor 38, dua mutasi titik p53 yang berbeda diidentifikasi: transversi G: C ke C: G pada kodon 135 dan transversi C: G ke G: C pada kodon 138 dari ekson 5. Mutasi ini menyebabkan perubahan asam amino dari alanin menjadi prolin dan sistein menjadi triptofan.

Garis sel Hep-70.4 menampilkan fenotipe morfologi yang bervariasi secara signifikan selama perbanyakannya. Beberapa sublines menunjukkan morfologi epitel, sementara yang lain menunjukkan penampilan seperti fibroblas. Heterogenitas ini mencerminkan sifat kompleks dari garis sel dan kemampuan beradaptasi di bawah kondisi kultur yang berbeda. Kehadiran alel p53 yang normal dan bermutasi pada bagian awal menunjukkan bahwa mutasi memberikan keuntungan pertumbuhan selektif, yang mengarah pada dominasi klon yang bermutasi dari waktu ke waktu.

Analisis protein filamen menengah dari garis sel Hep-70.4 mengungkapkan ekspresi keratin sederhana K8 dan K18, yang merupakan ciri khas sel hati normal, serta vimentin dan keratin K19 pada tingkat yang berbeda-beda. Pola protein ini mengkonfirmasi asal hepatositik dari garis sel dan klasifikasinya sebagai garis hepatoma. Stabilitas genom Hep-70.4 dinilai lebih lanjut melalui analisis sidik jari DNA, yang tidak menunjukkan adanya kelainan struktural utama, meskipun perubahan intensitas relatif dari pita-pita tertentu diamati dengan meningkatnya jumlah lintasan.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami