Hep-70.4

Η κυτταρική σειρά ηπατώματος Hep-70.4 προέρχεται από όγκο του ήπατος ποντικού, συγκεκριμένα από το στέλεχος ποντικού C57BL/6J. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι αξιοσημείωτη για τις μεταλλάξεις στο γονίδιο p53, οι οποίες εντοπίστηκαν σε διαφορετικά περάσματα κατά τον in vitro πολλαπλασιασμό. Στον αριθμό διέλευσης 8, ανιχνεύθηκε ένα ασθενές πρόσθετο σήμα στην ανάλυση πολυμορφισμού διαμόρφωσης μονής έλικας (SSCP), υποδεικνύοντας την παρουσία μιας μετάλλαξης p53. Μέχρι τον αριθμό διέλευσης 38, εντοπίστηκαν δύο διαφορετικές σημειακές μεταλλάξεις p53: μια μεταστροφή G:C σε C:G στο κωδικόνιο 135 και μια μεταστροφή C:G σε G:C στο κωδικόνιο 138 του εξωνίου 5. Οι μεταλλάξεις αυτές οδήγησαν σε αλλαγές αμινοξέων από αλανίνη σε προλίνη και από κυστεΐνη σε τρυπτοφάνη, αντίστοιχα.

Η κυτταρική σειρά Hep-70.4 εμφανίζει μορφολογικό φαινότυπο που μεταβάλλεται σημαντικά κατά τη διάρκεια του πολλαπλασιασμού της. Ορισμένες υποσειρές εμφανίζουν επιθηλιακή μορφολογία, ενώ άλλες παρουσιάζουν εμφάνιση που μοιάζει με ινοβλάστη. Αυτή η ετερογένεια αντανακλά την πολύπλοκη φύση της κυτταρικής σειράς και την προσαρμοστικότητά της σε διαφορετικές συνθήκες καλλιέργειας. Η παρουσία τόσο φυσιολογικών όσο και μεταλλαγμένων αλληλόμορφων p53 στα πρώτα περάσματα υποδηλώνει ότι οι μεταλλάξεις παρέχουν ένα επιλεκτικό πλεονέκτημα ανάπτυξης, οδηγώντας στην επικράτηση των μεταλλαγμένων κλώνων με την πάροδο του χρόνου.

Η ανάλυση των πρωτεϊνών ενδιάμεσων νηματίων της κυτταρικής σειράς Hep-70.4 αποκάλυψε την έκφραση των απλών κερατινών Κ8 και Κ18, οι οποίες είναι χαρακτηριστικές των φυσιολογικών ηπατικών κυττάρων, καθώς και της βιμεντίνης και της κερατίνης Κ19 σε διαφορετικό βαθμό. Αυτά τα πρωτεϊνικά μοτίβα επιβεβαιώνουν την ηπατοκυτταρική προέλευση της κυτταρικής σειράς και την ταξινόμησή της ως ηπατώματος. Η γονιδιωματική σταθερότητα της Hep-70.4 αξιολογήθηκε περαιτέρω μέσω της ανάλυσης δακτυλικών αποτυπωμάτων DNA, η οποία δεν αποκάλυψε σημαντικές δομικές ανωμαλίες, αν και παρατηρήθηκαν αλλαγές στις σχετικές εντάσεις ορισμένων ζωνών με την αύξηση του αριθμού διέλευσης.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης