İçeriğe atla
SW480-Luc
Doku
Kolon
Hastalık
Kolon adenokarsinomu

SW480-Luc

Cell line · Ürün numarası 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

SW480-Luc, insan SW480 kolon adenokarsinom hücre hattının biyolüminesan bir türevidir ve ateşböceği lusiferaz raportör genini istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır. Ana SW480 hücre hattı, 51 yaşındaki Kafkas erkek bir hastanın birincil kolon adenokarsinomundan oluşturulmuştur ve birincil kolorektal kanser modeli olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. SW480 hücreleri, epitel benzeri bir morfoloji sergiler ve KRAS G12V, TP53 R273H ve P309S ile APC kesilmesi gibi önemli onkojenik mutasyonları barındırır; bu da bu hücre hattını, kolorektal kanserde Wnt/β-katenin ve KRAS sinyal yolaklarının rolünü incelemek için uygun bir model haline getirir. Önemli bir nokta olarak, SW480, SW620 ile aynı hastadan elde edilmiştir ancak primer tümörü temsil eder; bu da primer ve metastatik kolorektal kanser biyolojisinin karşılaştırmalı çalışmalarına olanak tanır.

SW480-Luc'taki stabil lusiferaz entegrasyonu, bağışıklık sistemi baskılanmış konakçılar kullanılarak subkutan ve ortotopik ksenogreft modellerinde tümör yükünün hassas ve kantitatif biyolüminesans görüntülemesini (BLI) mümkün kılar. Yayılan lüminesan sinyal, canlı tümör hücresi sayısı ile korelasyon gösterir ve bu da tümörün greftlenmesi, büyüme kinetiği ve terapötik yanıtın noninvaziv uzunlamasına izlenmesini destekler. SW480-Luc, kolorektal kanserde KRAS hedefli ajanların, Wnt yolak inhibitörlerinin ve kemoterapötik rejimlerin in vivo değerlendirilmesinde ve ayrıca eşleşen metastatik SW620 suşuyla karşılaştırmalı çalışmalar için yaygın olarak kullanılmaktadır.

SW480-Luc, KRAS, TP53 ve APC mutasyonları dahil olmak üzere, ana SW480 hattının yerleşik moleküler özelliklerini korur. Lüseraz modifikasyonu, in vivo farmakodinamik çalışmalar için deneysel verimi ve duyarlılığı önemli ölçüde artırır. Araştırmacılar, geniş ölçekli preklinik kullanıma geçmeden önce, kendi özel deney koşulları altında lusiferaz aktivitesini, mutasyon profilini ve büyüme kinetiğini doğrulamalıdır.

Doku
Kolon
Hastalık
Kolon adenokarsinomu

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
SW480-Luc (Cytion katalog numarası 305698)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Epidermal büyüme faktörü (EGF), keratin (immünoperoksidaz boyama). Tümör invazivliği ile ilişkili bir metalloproteinaz olan matrilysin eksprese edilmez.
Protein ekspresyonu
P53 proteini; Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)
Antijen ekspresyonu
HLA A2, B8, B17, A kan grubu, Rh+. Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)
İzoenzimler
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutasyon profili
Mutasyon: p.Gln1338Ter, Homozigot; Mutasyon: p.Gly12Val, Homozigot; Mutasyon: p.Arg273His, Heterozigot; Mutasyon: p.Pro309Ser, Heterozigot
Virüsler
Ters transkriptaz negatif
Virüse karşı duyarlılık
İnsan immün yetmezlik virüsü (HIV, LAV)
Ürünler
Karsinoembriyonik antijen (CEA) 0,7 ng/106 hücre/10 gün, keratin, TGF-β. Hücrelerin GM-CSF ürettiği bildirilmiştir.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820600a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1–3 × 10⁴/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
51 yıl
Etnik köken
Kafkas