Tartalomra ugrás
SW480-Luc
Szövet
Vastagbél
Betegség
Vastagbél adenokarcinóma

Dokumentumok

SW480-Luc

Cell line · Termékszám 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az SW480-Luc az emberi SW480 vastagbél-adenokarcinóma sejtvonal biolumineszcens származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy stabilan kifejezze a szentjánosbogár-luciferáz riportergént. Az eredeti SW480 sejtvonalat egy 51 éves kaukázusi férfi beteg primer vastagbél-adenokarcinómájából állították elő, és széles körben használják primer kolorektális rák modelljeként. Az SW480 sejtek epiteliális jellegű morfológiát mutatnak, és olyan kulcsfontosságú onkogén mutációkat hordoznak, mint a KRAS G12V, a TP53 R273H és P309S, valamint az APC-trunkáció, ami ezt a vonalat releváns modellé teszi a Wnt/β-katenin és a KRAS jelátvitel szerepének vizsgálatához a kolorektális rákban. Fontos kiemelni, hogy az SW480 ugyanabból a betegből származik, mint az SW620, de az elsődleges daganatot képviseli, ami lehetővé teszi az elsődleges és a metasztatikus kolorektális rák biológiájának összehasonlító vizsgálatát.

A SW480-Luc-ban lévő stabil luciferáz-integráció lehetővé teszi a tumorterhelés érzékeny, kvantitatív biolumineszcens képalkotását (BLI) szubkután és ortotópos xenotranszplantátum-modellekben immunhiányos gazdaszervezetek felhasználásával. A kibocsátott lumineszcens jel korrelál az életképes tumorsejtek számával, ami lehetővé teszi a tumor beültetésének, növekedési kinetikájának és a terápiás válaszra adott reakciójának nem invazív, longitudinális nyomon követését. Az SW480-Luc-ot széles körben használják a KRAS-célzott szerek, a Wnt-útvonal gátlói és a kolorektális rák kemoterápiás kezeléseinek in vivo értékelésére, valamint a hozzá illeszkedő metasztatikus SW620 vonallal végzett összehasonlító vizsgálatokhoz.

Az SW480-Luc megőrzi az eredeti SW480 vonal jól ismert molekuláris jellemzőit, beleértve a KRAS-, TP53- és APC-mutációkat. A luciferáz-módosítás jelentősen növeli a kísérleti teljesítményt és az érzékenységet az in vivo farmakodinamikai vizsgálatok során. A kutatóknak a nagyszabású preklinikai alkalmazás előtt ellenőrizniük kell a luciferáz-aktivitást, a mutációs profilt és a növekedési kinetikát a saját kísérleti körülményeik között.

Szövet
Vastagbél
Betegség
Vastagbél adenokarcinóma

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
SW480-Luc (Cytion katalógusszám: 305698)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Epidermális növekedési faktor (EGF), keratin (immunoperoxidáz festés). A matrilizin, a tumor invazivitásával összefüggésbe hozható metalloproteináz nem expresszálódik.
Fehérjeexpresszió
P53 fehérje; Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)
Antigén-expresszió
HLA A2, B8, B17, A vércsoport, Rh+. Luc2 (szentjánosbogár, kodonoptimalizált)
Izoenzimek
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutációs profil
Mutáció: p.Gln1338Ter, homozigóta; Mutáció: p.Gly12Val, homozigóta; Mutáció: p.Arg273His, heterozigóta; Mutáció: p.Pro309Ser, heterozigóta
Vírusok
Fordított transzkriptáz negatív
Vírusérzékenység
Humán immunhiányos vírus (HIV, LAV)
Termékek
Karcinoembrionális antigén (CEA) 0,7 ng/106 sejt/10 nap, keratin, TGF-β. A sejtek a jelentések szerint GM-CSF-et termelnek.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
51 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi