Pāriet uz saturu
SW480-Luc
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Resnās zarnas adenokarcinoma

Dokumenti

SW480-Luc

Cell line · Preces numurs 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SW480-Luc ir cilvēka SW480 resnās zarnas adenokarcinomas šūnu līnijas bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā SW480 šūnu līnija tika izveidota no 51 gadu veca kaukāziešu izcelsmes vīrieša primārās resnās zarnas adenokarcinomas un tiek plaši izmantota kā primārā kolorektālā vēža modelis. SW480 šūnas uzrāda epitēlija tipa morfoloģiju un satur galvenās onkogēnās mutācijas, tostarp KRAS G12V, TP53 R273H un P309S, kā arī APC truncāciju, padarot šo līniju par atbilstošu modeli Wnt/β-katenīna un KRAS signālceļu lomas izpētei kolorektālajā vēzī. Svarīgi, ka SW480 tika iegūta no tā paša pacienta kā SW620, taču tā pārstāv primāro audzēju, kas ļauj veikt salīdzinošus pētījumus par primārā un metastātiskā kolorektālā vēža bioloģiju.

Stabila luciferāzes integrācija SW480-Luc ļauj veikt jutīgu, kvantitatīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI) audzēja slodzes novērtēšanai subkutānos un ortotopiskos ksenotransplantātu modeļos, izmantojot imūndeficītus saņēmējus. Izstarotais luminiscences signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, nodrošinot neinvazīvu audzēja iesakņošanās, augšanas kinētikas un terapeitiskās atbildes garenvirziena novērošanu. SW480-Luc tiek plaši izmantots KRAS mērķa līdzekļu, Wnt signālceļa inhibitoru un ķīmijterapijas shēmu in vivo novērtēšanai kolorektālajā vēzī, kā arī salīdzinošiem pētījumiem ar atbilstošo metastātisko SW620 līniju.

SW480-Luc saglabā vecāklīnijas SW480 molekulārās īpašības, tostarp KRAS, TP53 un APC mutācijas. Luciferāzes modifikācija ievērojami palielina eksperimentālo caurlaidspēju un jutību in vivo farmakodinamiskajos pētījumos. Pirms plaša pirmsklīniskā pielietojuma pētniekiem ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, mutāciju profils un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Resnās zarnas adenokarcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
SW480-Luc (Cytion kataloga numurs 305698)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Epidermas augšanas faktors (EGF), keratīns (imūnperoksidāzes krāsojums). Matrilizīns, metaloproteināze, kas saistīta ar audzēja invazivitāti, nav izteikts.
Proteīnu ekspresija
P53 proteīns; Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Antigēna ekspresija
HLA A2, B8, B17, asinsgrupa A, Rh+. Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutāciju profils
Mutācija: p.Gln1338Ter, homozigots; Mutācija: p.Gly12Val, homozigots; Mutācija: p.Arg273His, heterozigots; Mutācija: p.Pro309Ser, heterozigots
Vīrusi
Reversā transkriptāze negatīva
Jutība pret vīrusiem
Cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV, LAV)
Produkti
Karcinoembrionālais antigēns (CEA) 0,7 ng/106 šūnu/10 dienu, keratīns, TGF-β. Ir ziņots, ka šūnas ražo GM-CSF.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
51 gads
Etniskā piederība
Kaukāzietis