Ga naar de inhoud
SW480-Luc
Weefsel
Kolon
Ziekte
Colonadenocarcinoom

Documenten

SW480-Luc

Cell line · Productnummer 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

SW480-Luc is een bioluminescent derivaat van de menselijke SW480-adenocarcinoomcellijn van de dikke darm, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke SW480-cellijn is opgezet uit een primair colonadenocarcinoom van een 51-jarige blanke mannelijke patiënt en wordt op grote schaal gebruikt als model voor primaire colorectale kanker. SW480-cellen vertonen een epitheelachtige morfologie en bevatten belangrijke oncogene mutaties, waaronder KRAS G12V, TP53 R273H en P309S, en APC-truncatie, waardoor deze lijn een relevant model is voor het bestuderen van de rol van Wnt/β-catenine- en KRAS-signalering bij colorectale kanker. Belangrijk is dat SW480, net als SW620, afkomstig is van dezelfde patiënt, maar de primaire tumor vertegenwoordigt, waardoor vergelijkende studies mogelijk zijn naar de biologie van primaire versus gemetastaseerde colorectale kanker.

De stabiele integratie van luciferase in SW480-Luc maakt gevoelige, kwantitatieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk van de tumorbelasting in subcutane en orthotope xenotransplantaatmodellen met immuungecompromitteerde gastheerorganismen. Het uitgezonden luminescentiesignaal correleert met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat niet-invasieve longitudinale monitoring van de tumorengrafting, de groeikinetiek en de therapeutische respons mogelijk maakt. SW480-Luc wordt op grote schaal gebruikt voor in-vivo-evaluatie van KRAS-gerichte middelen, Wnt-route-remmers en chemotherapeutische behandelingen bij colorectale kanker, evenals voor vergelijkende studies met de bijbehorende metastatische SW620-lijn.

SW480-Luc behoudt de gevestigde moleculaire kenmerken van de oorspronkelijke SW480-lijn, waaronder KRAS-, TP53- en APC-mutaties. De luciferase-modificatie verhoogt de experimentele doorvoer en gevoeligheid voor in vivo farmacodynamische studies aanzienlijk. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, het mutatieprofiel en de groeikinetiek onder hun specifieke experimentele omstandigheden te verifiëren alvorens de lijn op grote schaal in preklinisch onderzoek in te zetten.

Weefsel
Kolon
Ziekte
Colonadenocarcinoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SW480-Luc (Cytion-catalogusnummer 305698)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Epidermale groeifactor (EGF), keratine (immunoperoxidase kleuring). Matrilysine, een metalloproteïnase geassocieerd met tumorinvasiviteit, komt niet tot expressie.
Eiwit-expressie
P53-eiwit; Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
Antigeenexpressie
HLA A2, B8, B17, bloedgroep A, Rh+. Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutatieprofiel
Mutatie: p.Gln1338Ter, Homozygoot; Mutatie: p.Gly12Val, Homozygoot; Mutatie: p.Arg273His, Heterozygoot; Mutatie: p.Pro309Ser, Heterozygoot
Virussen
Omgekeerde transcriptase negatief
Gevoeligheid voor virussen
Humaan immunodeficiëntievirus (HIV, LAV)
Producten
Carcinoembryonisch antigeen (CEA) 0,7 ng/106 cellen/10 dagen, keratine, TGF-β. De cellen produceren naar verluidt GM-CSF.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiele Glutamine, w: 1,0 mM natriumpyruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
51 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch