SW480-Luc
Cell line · Artikelnummer 305698
SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...
Anpassung / Empfehlungen
- SW480-LucCell line€777.00
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
SW480-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen SW480-Kolonadenokarzinom-Zelllinie, das so gentechnisch verändert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche SW480-Zelllinie wurde aus einem primären Kolonadenokarzinom eines 51-jährigen männlichen Patienten kaukasischer Abstammung etabliert und wird häufig als Modell für primären kolorektalen Krebs verwendet. SW480-Zellen weisen eine epithelähnliche Morphologie auf und tragen wichtige onkogene Mutationen in sich, darunter KRAS G12V, TP53 R273H und P309S sowie eine APC-Trunkierung, was diese Zelllinie zu einem relevanten Modell für die Untersuchung der Rolle der Wnt/β-Catenin- und KRAS-Signalwege bei kolorektalem Karzinom macht. Wichtig ist, dass SW480 vom selben Patienten stammt wie SW620, jedoch den Primärtumor repräsentiert, was vergleichende Untersuchungen der Biologie von primärem und metastasiertem Kolorektalkarzinom ermöglicht.
Die stabile Integration von Luciferase in SW480-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in subkutanen und orthotopen Xenotransplantatmodellen unter Verwendung immungeschwächter Wirte. Das emittierte Lumineszenzsignal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und ermöglicht so eine nichtinvasive Langzeitüberwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik und des Ansprechens auf die Therapie. SW480-Luc wird häufig für die In-vivo-Bewertung von KRAS-gerichteten Wirkstoffen, Wnt-Signalweg-Inhibitoren und Chemotherapien bei kolorektalem Karzinom sowie für Vergleichsstudien mit der passenden metastatischen SW620-Linie eingesetzt.
SW480-Luc behält die etablierten molekularen Eigenschaften der Elternlinie SW480 bei, einschließlich der KRAS-, TP53- und APC-Mutationen. Die Luciferase-Modifikation erhöht den experimentellen Durchsatz und die Empfindlichkeit für pharmakodynamische In-vivo-Studien erheblich. Forscher sollten die Luziferaseaktivität, das Mutationsprofil und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen vor dem groß angelegten präklinischen Einsatz überprüfen.
- Gewebe
- Doppelpunkt
- Krankheit
- Adenokarzinom des Dickdarms
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Männlich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- GVO-Status
- GMO-S1
- Angaben zum GVO-Status
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Tumorauslösend
- Ja, in Nacktmäusen
04Bezeichner
- Quellenangabe
- SW480-Luc (Cytion-Katalognummer 305698)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_C8Y1
05Expression und Anfälligkeit
- Exprimierte Rezeptoren
- Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), Keratin (Immunoperoxidase-Färbung). Matrilysin, eine Metalloproteinase, die mit der Invasivität von Tumoren in Verbindung gebracht wird, wird nicht exprimiert.
- Proteinexpression
- P53-Protein; Luc2 (Glühwürmchen, codonoptimiert)
- Antigenexpression
- HLA A2, B8, B17, Blutgruppe A, Rh+. Luc2 (Glühwürmchen, codonoptimiert)
- Isoenzyme
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
- Mutationsprofil
- Mutation: p.Gln1338Ter, Homozygot; Mutation: p.Gly12Val, Homozygot; Mutation: p.Arg273His, Heterozygot; Mutation: p.Pro309Ser, Heterozygot
- Viren
- Reverse Transkriptase negativ
- Anfälligkeit für Viren
- Humanes Immundefizienz-Virus (HIV, LAV)
- Produkte
- Carcinoembryonales Antigen (CEA) 0,7 ng/106 Zellen/10 Tage, Keratin, TGF-β. Es wurde berichtet, dass die Zellen GM-CSF produzieren.
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Split-Verhältnis
- 1 bis 3
- Aussaatdichte
- 1–3 × 10⁴/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 51 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja
