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SW480-Luc
Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom des Dickdarms

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SW480-Luc

Cell line · Artikelnummer 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

SW480-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen SW480-Kolonadenokarzinom-Zelllinie, das so gentechnisch verändert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche SW480-Zelllinie wurde aus einem primären Kolonadenokarzinom eines 51-jährigen männlichen Patienten kaukasischer Abstammung etabliert und wird häufig als Modell für primären kolorektalen Krebs verwendet. SW480-Zellen weisen eine epithelähnliche Morphologie auf und tragen wichtige onkogene Mutationen in sich, darunter KRAS G12V, TP53 R273H und P309S sowie eine APC-Trunkierung, was diese Zelllinie zu einem relevanten Modell für die Untersuchung der Rolle der Wnt/β-Catenin- und KRAS-Signalwege bei kolorektalem Karzinom macht. Wichtig ist, dass SW480 vom selben Patienten stammt wie SW620, jedoch den Primärtumor repräsentiert, was vergleichende Untersuchungen der Biologie von primärem und metastasiertem Kolorektalkarzinom ermöglicht.

Die stabile Integration von Luciferase in SW480-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in subkutanen und orthotopen Xenotransplantatmodellen unter Verwendung immungeschwächter Wirte. Das emittierte Lumineszenzsignal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und ermöglicht so eine nichtinvasive Langzeitüberwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik und des Ansprechens auf die Therapie. SW480-Luc wird häufig für die In-vivo-Bewertung von KRAS-gerichteten Wirkstoffen, Wnt-Signalweg-Inhibitoren und Chemotherapien bei kolorektalem Karzinom sowie für Vergleichsstudien mit der passenden metastatischen SW620-Linie eingesetzt.

SW480-Luc behält die etablierten molekularen Eigenschaften der Elternlinie SW480 bei, einschließlich der KRAS-, TP53- und APC-Mutationen. Die Luciferase-Modifikation erhöht den experimentellen Durchsatz und die Empfindlichkeit für pharmakodynamische In-vivo-Studien erheblich. Forscher sollten die Luziferaseaktivität, das Mutationsprofil und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen vor dem groß angelegten präklinischen Einsatz überprüfen.

Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom des Dickdarms

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
SW480-Luc (Cytion-Katalognummer 305698)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), Keratin (Immunoperoxidase-Färbung). Matrilysin, eine Metalloproteinase, die mit der Invasivität von Tumoren in Verbindung gebracht wird, wird nicht exprimiert.
Proteinexpression
P53-Protein; Luc2 (Glühwürmchen, codonoptimiert)
Antigenexpression
HLA A2, B8, B17, Blutgruppe A, Rh+. Luc2 (Glühwürmchen, codonoptimiert)
Isoenzyme
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutationsprofil
Mutation: p.Gln1338Ter, Homozygot; Mutation: p.Gly12Val, Homozygot; Mutation: p.Arg273His, Heterozygot; Mutation: p.Pro309Ser, Heterozygot
Viren
Reverse Transkriptase negativ
Anfälligkeit für Viren
Humanes Immundefizienz-Virus (HIV, LAV)
Produkte
Carcinoembryonales Antigen (CEA) 0,7 ng/106 Zellen/10 Tage, Keratin, TGF-β. Es wurde berichtet, dass die Zellen GM-CSF produzieren.

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
1–3 × 10⁴/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
51 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch