Gå til innholdet
SW480-Luc
Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom i tykktarmen

Dokumenter

SW480-Luc

Cell line · Produktnummer 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SW480-Luc er et bioluminescerende derivat av den humane SW480-cellelinjen for adenokarsinom i tykktarmen, som er genetisk modifisert til å uttrykke et reportergen for ildflue-luciferase på en stabil måte. Den opprinnelige SW480-cellelinjen ble etablert fra et primært adenokarsinom i tykktarmen hos en 51 år gammel kaukasisk mannlig pasient og brukes mye som modell for primær kolorektal kreft. SW480-celler har en epitelignende morfologi og bærer viktige onkogene mutasjoner, inkludert KRAS G12V, TP53 R273H og P309S, samt APC-trunkering, noe som gjør denne linjen til en relevant modell for å studere rollen til Wnt/β-katenin- og KRAS-signalering i kolorektal kreft. Det er viktig å merke seg at SW480 stammer fra samme pasient som SW620, men representerer primærtumoren, noe som muliggjør sammenlignende studier av biologien til primær versus metastatisk kolorektal kreft.

Den stabile luciferase-integrasjonen i SW480-Luc muliggjør sensitiv, kvantitativ bioluminescensavbildning (BLI) av tumorbyrden i subkutane og ortotopiske xenotransplantatmodeller ved bruk av immunsvekkede verter. Det utsendte luminescenssignalet korrelerer med antall levedyktige tumorceller, noe som muliggjør ikke-invasiv longitudinell overvåking av tumorinnpodning, vekstkinetikk og terapeutisk respons. SW480-Luc brukes mye til in vivo-evaluering av KRAS-målrettede midler, Wnt-signalveihhemmere og kjemoterapeutiske behandlingsregimer ved kolorektal kreft, samt til sammenlignende studier med den tilsvarende metastatiske SW620-linjen.

SW480-Luc beholder de etablerte molekylære egenskapene til den opprinnelige SW480-linjen, inkludert KRAS-, TP53- og APC-mutasjoner. Luciferase-modifikasjonen forbedrer eksperimentell gjennomstrømning og følsomhet for farmakodynamiske studier in vivo betydelig. Forskere bør verifisere luciferaseaktivitet, mutasjonsprofil og vekstkinetikk under sine spesifikke eksperimentelle forhold før storskala preklinisk bruk.

Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom i tykktarmen

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SW480-Luc (Cytion-katalognummer 305698)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Epidermal vekstfaktor (EGF), keratin (immunoperoksidasefarging). Matrilysin, en metalloproteinase som er assosiert med tumorinvasivitet, uttrykkes ikke.
Proteinekspresjon
P53-protein; Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)
Antigenuttrykk
HLA A2, B8, B17, blodtype A, Rh+. Luc2 (ildflue, kodonoptimalisert)
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutasjonsprofil
Mutasjon: p.Gln1338Ter, homozygot; Mutasjon: p.Gly12Val, homozygot; Mutasjon: p.Arg273His, heterozygot; Mutasjon: p.Pro309Ser, heterozygot
Virus
Revers transkriptase negativ
Virusfølsomhet
Humant immunsviktvirus (HIV, LAV)
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 0,7 ng/106 celler/10 dager, keratin, TGF-β. Det er rapportert at cellene produserer GM-CSF.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
1–3 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
51 år
Etnisitet
Kaukasisk