SW480-Luc
Cell line · Product number 305698
SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
SW480-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי SW480 של אדנוקרצינומה במעי הגס, שהונדס כך שיבטא באופן יציב את גן הרפורט של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים SW480 המקורי הוקם מאדנוקרצינומה ראשונית של המעי הגס של מטופל גבר לבן בן 51, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לסרטן המעי הגס הראשוני. תאי SW480 מציגים מורפולוגיה דמוית אפיתל ומכילים מוטציות אונקוגניות מרכזיות, כולל KRAS G12V, TP53 R273H ו-P309S, וכן קיצור של APC, מה שהופך את הקו הזה למודל רלוונטי לחקר תפקידם של מסלולי האיתות Wnt/β-catenin ו-KRAS בסרטן המעי הגס. חשוב לציין כי SW480 נגזר מאותו חולה כמו SW620, אך מייצג את הגידול הראשוני, מה שמאפשר מחקרים השוואתיים בין הביולוגיה של סרטן המעי הגס הראשוני לזו של סרטן המעי הגס הגרורתי.
השילוב היציב של לוקיפרז ב-SW480-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומינציה (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלים תת-עוריים ואורתוטופיים, תוך שימוש במאכסנים בעלי מערכת חיסונית מוחלשת. האות הזוהר הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח ולא פולשני של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה והתגובה הטיפולית. SW480-Luc נמצא בשימוש נרחב להערכה in vivo של חומרים המכוונים ל-KRAS, מעכבי מסלול Wnt ומשטרי כימותרפיה בסרטן המעי הגס, וכן למחקרים השוואתיים עם קו SW620 הגרורתי התואם.
SW480-Luc שומר על המאפיינים המולקולריים המוכרים של קו SW480 ההורי, כולל מוטציות ב-KRAS, TP53 ו-APC. השינוי בלוקיפרז משפר באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ואת הרגישות למחקרים פרמקודינמיים in vivo. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את פרופיל המוטציות ואת קינטיקת הגידול בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש פרה-קליני בקנה מידה גדול.
- Tissue
- קולון
- Disease
- אדנוקרצינומה של המעי הגס
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
04Identifiers
- Citation
- SW480-Luc (מספר קטלוג Cytion 305698)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_C8Y1
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- פקטור גדילה אפידרמלי (EGF), קרטין (צביעת אימונופרוקסידאז). מטריליזין, מטאלופרוטאינז הקשור לפולשנות הגידול, אינו בא לידי ביטוי.
- Protein expression
- חלבון P53; Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
- Antigen expression
- HLA A2, B8, B17, סוג דם A, Rh+. Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
- Mutational profile
- מוטציה: p.Gln1338Ter, הומוזיגוטי; מוטציה: p.Gly12Val, הומוזיגוטי; מוטציה: p.Arg273His, הטרוזיגוטי; מוטציה: p.Pro309Ser, הטרוזיגוטי
- Viruses
- שלילי לטרנסקריפטאז הפוך
- Virus susceptibility
- נגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV, LAV)
- Products
- אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) 0.7 ng/106 תאים/10 ימים, קרטין, TGF-β. דווח כי התאים מייצרים GM-CSF.
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 1–3*10^4/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 51 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
