Skip to content
SW480-Luc
Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה של המעי הגס

Documents

SW480-Luc

Cell line · Product number 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

US$777.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

SW480-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי SW480 של אדנוקרצינומה במעי הגס, שהונדס כך שיבטא באופן יציב את גן הרפורט של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים SW480 המקורי הוקם מאדנוקרצינומה ראשונית של המעי הגס של מטופל גבר לבן בן 51, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לסרטן המעי הגס הראשוני. תאי SW480 מציגים מורפולוגיה דמוית אפיתל ומכילים מוטציות אונקוגניות מרכזיות, כולל KRAS G12V, TP53 R273H ו-P309S, וכן קיצור של APC, מה שהופך את הקו הזה למודל רלוונטי לחקר תפקידם של מסלולי האיתות Wnt/β-catenin ו-KRAS בסרטן המעי הגס. חשוב לציין כי SW480 נגזר מאותו חולה כמו SW620, אך מייצג את הגידול הראשוני, מה שמאפשר מחקרים השוואתיים בין הביולוגיה של סרטן המעי הגס הראשוני לזו של סרטן המעי הגס הגרורתי.

השילוב היציב של לוקיפרז ב-SW480-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומינציה (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלים תת-עוריים ואורתוטופיים, תוך שימוש במאכסנים בעלי מערכת חיסונית מוחלשת. האות הזוהר הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר ניטור ארוך טווח ולא פולשני של השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה והתגובה הטיפולית. SW480-Luc נמצא בשימוש נרחב להערכה in vivo של חומרים המכוונים ל-KRAS, מעכבי מסלול Wnt ומשטרי כימותרפיה בסרטן המעי הגס, וכן למחקרים השוואתיים עם קו SW620 הגרורתי התואם.

SW480-Luc שומר על המאפיינים המולקולריים המוכרים של קו SW480 ההורי, כולל מוטציות ב-KRAS, TP53 ו-APC. השינוי בלוקיפרז משפר באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ואת הרגישות למחקרים פרמקודינמיים in vivo. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את פרופיל המוטציות ואת קינטיקת הגידול בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש פרה-קליני בקנה מידה גדול.

Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה של המעי הגס

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים

04Identifiers

Citation
SW480-Luc (מספר קטלוג Cytion 305698)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
פקטור גדילה אפידרמלי (EGF), קרטין (צביעת אימונופרוקסידאז). מטריליזין, מטאלופרוטאינז הקשור לפולשנות הגידול, אינו בא לידי ביטוי.
Protein expression
חלבון P53; Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
Antigen expression
HLA A2, B8, B17, סוג דם A, Rh+. Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutational profile
מוטציה: p.Gln1338Ter, הומוזיגוטי; מוטציה: p.Gly12Val, הומוזיגוטי; מוטציה: p.Arg273His, הטרוזיגוטי; מוטציה: p.Pro309Ser, הטרוזיגוטי
Viruses
שלילי לטרנסקריפטאז הפוך
Virus susceptibility
נגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV, LAV)
Products
אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) 0.7 ng/106 תאים/10 ימים, קרטין, TGF-β. דווח כי התאים מייצרים GM-CSF.

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1–3*10^4/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
51 שנים
Ethnicity
קווקזי