Gå direkte til indholdet
SW480-Luc
Væv
Tarm
Sygdom
Adenokarcinom i tyktarmen

Dokumenter

SW480-Luc

Cell line · Varenummer 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

SW480-Luc er et bioluminescerende derivat af den humane SW480-kolonadenokarcinom-cellelinje, der er genetisk modificeret til stabilt at udtrykke et reportergen baseret på ildflue-luciferase. Den oprindelige SW480-cellelinje blev etableret ud fra et primært adenokarcinom i tyktarmen hos en 51-årig kaukasisk mandlig patient og anvendes i vid udstrækning som model for primær kolorektal kræft. SW480-celler udviser epitelagtig morfologi og bærer vigtige onkogene mutationer, herunder KRAS G12V, TP53 R273H og P309S samt APC-trunkering, hvilket gør denne linje til en relevant model til at studere rollen af Wnt/β-catenin- og KRAS-signalering i kolorektal kræft. Det er vigtigt at bemærke, at SW480 stammer fra samme patient som SW620, men repræsenterer den primære tumor, hvilket muliggør sammenlignende studier af biologien bag primær kontra metastatisk kolorektal kræft.

Den stabile luciferase-integration i SW480-Luc muliggør følsom, kvantitativ bioluminescensbilleddannelse (BLI) af tumorbyrden i subkutane og ortotopiske xenotransplantatmodeller ved brug af immunkompromitterede værter. Det udsendte luminescenssignal korrelerer med antallet af levedygtige tumorceller, hvilket understøtter ikke-invasiv, langsgående overvågning af tumorens inkorporering, vækstkinetik og terapeutisk respons. SW480-Luc anvendes i vid udstrækning til in vivo-evaluering af KRAS-målrettede midler, Wnt-signalvejsinhibitorer og kemoterapeutiske behandlingsregimer ved kolorektal kræft samt til sammenlignende studier med den tilsvarende metastatiske SW620-linje.

SW480-Luc bevarer de etablerede molekylære egenskaber fra den oprindelige SW480-linje, herunder KRAS-, TP53- og APC-mutationer. Luciferase-modifikationen forbedrer eksperimentel gennemstrømning og følsomhed væsentligt til in vivo-farmakodynamiske studier. Forskere bør verificere luciferaseaktiviteten, mutationsprofilen og vækstkinetikken under deres specifikke eksperimentelle betingelser, inden der foretages præklinisk anvendelse i stor skala.

Væv
Tarm
Sygdom
Adenokarcinom i tyktarmen

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SW480-Luc (Cytion-katalognummer 305698)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Epidermal vækstfaktor (EGF), keratin (immunoperoxidase-farvning). Matrilysin, en metalloproteinase, der er forbundet med tumorinvasivitet, udtrykkes ikke.
Proteinekspression
P53-protein; Luc2 (ildflue, kodonoptimeret)
Antigenudtryk
HLA A2, B8, B17, blodtype A, Rh+. Luc2 (ildflue, kodonoptimeret)
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutationsprofil
Mutation: p.Gln1338Ter, Homozygot; Mutation: p.Gly12Val, Homozygot; Mutation: p.Arg273His, Heterozygot; Mutation: p.Pro309Ser, Heterozygot
Vira
Revers transkriptase negativ
Virusfølsomhed
Human immundefekt-virus (HIV, LAV)
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 0,7 ng/106 celler/10 dage, keratin, TGF-β. Det er blevet rapporteret, at cellerne producerer GM-CSF.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
1–3 × 10⁴/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
51 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk