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SW480-Luc
Tissue
Deux-points
Disease
Adénocarcinome du côlon

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SW480-Luc

Cell line · Product number 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

US$777.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

La lignée cellulaire SW480-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire humaine SW480 d’adénocarcinome du côlon, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de la luciole. La lignée cellulaire parentale SW480 a été établie à partir d’un adénocarcinome primitif du côlon d’un patient de sexe masculin de type caucasien âgé de 51 ans et est largement utilisée comme modèle de cancer colorectal primitif. Les cellules SW480 présentent une morphologie de type épithélial et portent des mutations oncogéniques clés, notamment KRAS G12V, TP53 R273H et P309S, ainsi qu’une troncature du gène APC, ce qui fait de cette lignée un modèle pertinent pour l’étude du rôle des voies de signalisation Wnt/β-caténine et KRAS dans le cancer colorectal. Il est important de noter que la lignée SW480 provient du même patient que la lignée SW620, mais qu’elle représente la tumeur primaire, ce qui permet de mener des études comparatives sur la biologie du cancer colorectal primaire par rapport à celle du cancer colorectal métastatique.

L’intégration stable de la luciférase dans la lignée SW480-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et quantitative de la charge tumorale dans des modèles de xénogreffes sous-cutanées et orthotopiques utilisant des hôtes immunodéprimés. Le signal luminescent émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal non invasif de la prise de greffe, de la cinétique de croissance et de la réponse thérapeutique. La lignée SW480-Luc est largement utilisée pour l’évaluation in vivo d’agents ciblant KRAS, d’inhibiteurs de la voie Wnt et de schémas chimiothérapeutiques dans le cancer colorectal, ainsi que pour des études comparatives avec la lignée métastatique appariée SW620.

La lignée SW480-Luc conserve les caractéristiques moléculaires établies de la lignée parentale SW480, y compris les mutations de KRAS, TP53 et APC. La modification par la luciférase améliore considérablement le débit expérimental et la sensibilité pour les études pharmacodynamiques in vivo. Les chercheurs doivent vérifier l’activité de la luciférase, le profil mutationnel et la cinétique de croissance dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation préclinique à grande échelle.

Tissue
Deux-points
Disease
Adénocarcinome du côlon

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Oui, chez les souris nues

04Identifiers

Citation
SW480-Luc (numéro de catalogue Cytion 305698)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Facteur de croissance épidermique (EGF), kératine (coloration à l’immunoperoxydase). La matrilysine, une métalloprotéinase associée au caractère invasif des tumeurs, n’est pas exprimée.
Protein expression
Protéine P53; Luc2 (luciole, codon optimisé)
Antigen expression
HLA A2, B8, B17, groupe sanguin A, Rh+. Luc2 (luciole, codon optimisé)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutational profile
Mutation : p.Gln1338Ter, homozygote; Mutation : p.Gly12Val, homozygote; Mutation : p.Arg273His, hétérozygote; Mutation : p.Pro309Ser, hétérozygote
Viruses
Négatif à la transcriptase inverse
Virus susceptibility
Virus de l'immunodéficience humaine (VIH, LAV)
Products
Antigène carcino-embryonnaire (ACE) : 0,7 ng/10⁶ cellules/10 jours, kératine, TGF-β. Il a été rapporté que ces cellules produisent du GM-CSF.

06Handling and culture

Culture medium
F12 de Ham, contenant : 1,0 mM de glutamine stable, 1,0 mM de pyruvate de sodium, 1,1 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Split ratio
1 à 3
Seeding density
1-3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
51 ans
Ethnicity
caucasien