Siirry sisältöön
SW480-Luc
Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Paksusuolen adenokarsinooma

Asiakirjat

SW480-Luc

Cell line · Tuotenumero 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SW480-Luc on ihmisen SW480-paksusuolen adenokarsinoomasolulinjan bioluminesoiva johdannainen, joka on muokattu ilmentämään vakaasti tulikärpäsen lusiferaasi-raportointigeeniä. Alkuperäinen SW480-solulinja perustettiin 51-vuotiaan valkoihoisen miespotilaan primaarisesta paksusuolen adenokarsinoomasta, ja sitä käytetään laajalti primaarisen kolorektaalisyövän mallina. SW480-solut ovat morfologialtaan epiteelin kaltaisia ja niissä esiintyy keskeisiä onkogeenisiä mutaatioita, kuten KRAS G12V, TP53 R273H ja P309S sekä APC-trunkaatio, minkä vuoksi tämä solulinja on merkityksellinen malli Wnt/β-kateniini- ja KRAS-signaloinnin roolin tutkimiseen paksusuolisyövässä. Merkittävää on, että SW480 on peräisin samalta potilaalta kuin SW620, mutta edustaa primaarista kasvainta, mikä mahdollistaa primaarisen ja metastaattisen kolorektaalisyövän biologian vertailututkimukset.

SW480-Luc-linjaan integroitu stabiili lusiferaasi mahdollistaa herkän, kvantitatiivisen bioluminesenssikuvantamisen (BLI) kasvaimen kuormituksesta ihonalaisissa ja ortotopisissa ksenotransplantaattimalleissa, joissa käytetään immuunipuutteisia isäntiä. Lähetetty luminesenssisignaali korreloi elävien kasvainsolujen lukumäärän kanssa, mikä tukee kasvaimen kiinnittymisen, kasvukineettisten ominaisuuksien ja hoitovasteen ei-invasiivista pitkittäistutkimusta. SW480-Luc-kantaa käytetään laajalti KRAS-kohdennettujen lääkeaineiden, Wnt-signalointireitin estäjien ja kolorektaalisyövän kemoterapiahoitojen in vivo -arviointiin sekä vertailututkimuksiin vastaavan metastaattisen SW620-kannan kanssa.

SW480-Luc säilyttää emolinjan SW480 vakiintuneet molekyyliominaisuudet, mukaan lukien KRAS-, TP53- ja APC-mutaatiot. Lusiferaasimodifikaatio parantaa merkittävästi kokeiden läpimenokapasiteettia ja herkkyyttä in vivo -farmakodynaamisissa tutkimuksissa. Tutkijoiden tulee tarkistaa lusiferaasiaktiivisuus, mutaatioprofiili ja kasvukineettiset ominaisuudet omissa kokeellisissa olosuhteissaan ennen laajamittaista prekliinistä käyttöä.

Kudos
Paksusuoli
Sairaus
Paksusuolen adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
SW480-Luc (Cytion-tuotenumero 305698)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Epiderminen kasvutekijä (EGF), keratiini (immunoperoksidaasivärjäys). Matrilysiini, joka on kasvaimen invasiivisuuteen liittyvä metalloproteinaasi, ei ilmentynyt.
Proteiinin ilmentyminen
P53-proteiini; Luc2 (tulikärpänen, kodonien suhteen optimoitu)
Antigeenin ilmentyminen
HLA A2, B8, B17, veriryhmä A, Rh+. Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutaatioprofiili
Mutaatio: p.Gln1338Ter, homotsygootti; Mutaatio: p.Gly12Val, homotsygootti; Mutaatio: p.Arg273His, heterotsygootti; Mutaatio: p.Pro309Ser, heterotsygootti
Virukset
Käänteinen transkriptaasi negatiivinen
Viruksille altistuminen
Ihmisen immuunikatovirus (HIV, LAV)
Tuotteet
Karsinoembryoninen antigeeni (CEA) 0,7 ng/106 solua/10 päivää, keratiini, TGF-β. Solujen on raportoitu tuottavan GM-CSF:ää.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
51 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen