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SW480-Luc
Tessuto
Colon
Malattia
Adenocarcinoma del colon

Documenti

SW480-Luc

Cell line · Codice prodotto 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

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01Informazioni generali

Descrizione

SW480-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare SW480, proveniente da un adenocarcinoma del colon umano, ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un gene reporter codificante la luciferasi della lucciola. La linea cellulare parentale SW480 è stata ottenuta da un adenocarcinoma del colon primario di un paziente maschio caucasico di 51 anni ed è ampiamente utilizzata come modello di tumore colorettale primario. Le cellule SW480 presentano una morfologia di tipo epiteliale e ospitano mutazioni oncogeniche chiave, tra cui KRAS G12V, TP53 R273H e P309S, nonché una troncazione del gene APC; ciò rende questa linea un modello rilevante per lo studio del ruolo delle vie di segnalazione Wnt/β-catenina e KRAS nel cancro del colon-retto. È importante sottolineare che la linea SW480 è stata derivata dallo stesso paziente della linea SW620, ma rappresenta il tumore primario, consentendo studi comparativi sulla biologia del carcinoma colorettale primario rispetto a quello metastatico.

L’integrazione stabile della luciferasi in SW480-Luc consente un’imaging bioluminescente (BLI) sensibile e quantitativo del carico tumorale in modelli di xenotrapianto sottocutaneo e ortotopico utilizzando ospiti immunocompromessi. Il segnale luminescente emesso è correlato al numero di cellule tumorali vitali, consentendo il monitoraggio longitudinale non invasivo dell’attecchimento del tumore, della cinetica di crescita e della risposta terapeutica. SW480-Luc è ampiamente utilizzato per la valutazione in vivo di agenti mirati a KRAS, inibitori della via di segnalazione Wnt e regimi chemioterapici nel carcinoma colorettale, nonché per studi comparativi con la linea metastatica corrispondente SW620.

SW480-Luc conserva le caratteristiche molecolari consolidate della linea parentale SW480, comprese le mutazioni di KRAS, TP53 e APC. La modifica con la luciferasi migliora notevolmente la produttività sperimentale e la sensibilità per gli studi farmacodinamici in vivo. I ricercatori dovrebbero verificare l’attività della luciferasi, il profilo mutazionale e la cinetica di crescita nelle loro specifiche condizioni sperimentali prima di un impiego preclinico su larga scala.

Tessuto
Colon
Malattia
Adenocarcinoma del colon

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SW480-Luc (codice catalogo Cytion 305698)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Fattore di crescita epidermico (EGF), cheratina (colorazione con immunoperossidasi). La matrilisina, una metalloproteinasi associata all'invasività del tumore, non è espressa.
Espressione proteica
Proteina P53; Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)
Espressione dell'antigene
HLA A2, B8, B17, gruppo sanguigno A, Rh+. Luc2 (lucciola, ottimizzato a livello di codoni)
Isoenzimi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Profilo mutazionale
Mutazione: p.Gln1338Ter, omozigote; Mutazione: p.Gly12Val, omozigote; Mutazione: p.Arg273His, eterozigote; Mutazione: p.Pro309Ser, eterozigote
Virus
Negativo alla trascrittasi inversa
Suscettibilità ai virus
Virus dell'immunodeficienza umana (HIV, LAV)
Prodotti
Antigene carcinoembrionale (CEA) 0,7 ng/106 cellule/10 giorni, cheratina, TGF-β. È stato segnalato che le cellule producono GM-CSF.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,1 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820600a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
1-3*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
51 anni
Etnia
Caucasico