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SW480-Luc
Tissue
Dos puntos
Disease
Adenocarcinoma de colon

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SW480-Luc

Cell line · Product number 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

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1

01General information

Description

SW480-Luc es un derivado bioluminiscente de la línea celular SW480 de adenocarcinoma de colon humano, modificada genéticamente para expresar de manera estable un gen reportero de luciferasa de luciérnaga. La línea celular parental SW480 se estableció a partir de un adenocarcinoma primario de colon de un paciente caucásico de 51 años y se utiliza ampliamente como modelo de cáncer colorrectal primario. Las células SW480 presentan una morfología de tipo epitelial y albergan mutaciones oncogénicas clave, entre ellas KRAS G12V, TP53 R273H y P309S, así como la truncación de APC, lo que convierte a esta línea en un modelo relevante para estudiar el papel de las vías de señalización Wnt/β-catenina y KRAS en el cáncer colorrectal. Es importante destacar que la línea SW480 se derivó del mismo paciente que la SW620, pero representa el tumor primario, lo que permite realizar estudios comparativos de la biología del cáncer colorrectal primario frente al metastásico.

La integración estable de luciferasa en SW480-Luc permite la obtención de imágenes de bioluminiscencia (BLI) sensibles y cuantitativas de la carga tumoral en modelos de xenoinjertos subcutáneos y ortotópicos utilizando huéspedes inmunodeprimidos. La señal luminiscente emitida se correlaciona con el número de células tumorales viables, lo que permite el monitoreo longitudinal no invasivo del injerto tumoral, la cinética de crecimiento y la respuesta terapéutica. La línea SW480-Luc se utiliza ampliamente para la evaluación in vivo de agentes dirigidos contra KRAS, inhibidores de la vía Wnt y regímenes quimioterapéuticos en el cáncer colorrectal, así como para estudios comparativos con la línea metastática SW620 correspondiente.

SW480-Luc conserva las características moleculares establecidas de la línea parental SW480, incluidas las mutaciones en KRAS, TP53 y APC. La modificación con luciferasa mejora sustancialmente el rendimiento experimental y la sensibilidad para los estudios farmacodinámicos in vivo. Los investigadores deben verificar la actividad de la luciferasa, el perfil mutacional y la cinética de crecimiento en sus condiciones experimentales específicas antes de su uso preclínico a gran escala.

Tissue
Dos puntos
Disease
Adenocarcinoma de colon

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Sí, en ratones desnudos

04Identifiers

Citation
SW480-Luc (número de catálogo de Cytion 305698)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Factor de crecimiento epidérmico (EGF), queratina (tinción con inmunoperoxidasa). No se expresa la matrilisina, una metaloproteasa asociada a la invasividad tumoral.
Protein expression
Proteína P53; Luc2 (luciérnaga, optimizada por codones)
Antigen expression
HLA A2, B8, B17, grupo sanguíneo A, Rh+. Luc2 (luciérnaga, optimizado por codones)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutational profile
Mutación: p.Gln1338Ter, homocigótica; Mutación: p.Gly12Val, homocigótica; Mutación: p.Arg273His, heterocigótica; Mutación: p.Pro309Ser, heterocigótica
Viruses
Negativo para la transcriptasa inversa
Virus susceptibility
Virus de la inmunodeficiencia humana (VIH, LAV)
Products
Antígeno carcinoembrionario (CEA) 0,7 ng/10⁶ células/10 días, queratina, TGF-β. Se ha informado que las células producen GM-CSF.

06Handling and culture

Culture medium
F12 de Ham, con: 1,0 mM de glutamina estable, con: 1,0 mM de piruvato de sodio, con: 1,1 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Split ratio
1 a 3
Seeding density
1-3*10^4/cm²
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
51 años
Ethnicity
caucásico