Премини към съдържанието
SW480-Luc
Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Аденокарцином на дебелото черво

Документи

SW480-Luc

Cell line · Номер на продукта 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

SW480-Luc е биолуминесцентен вариант на човешката клетъчна линия SW480 от аденокарцином на дебелото черво, модифицирана така, че стабилно да експресира репортерния ген на луциферазата на светулката. Първоначалната клетъчна линия SW480 е създадена от първичен аденокарцином на дебелото черво на 51-годишен пациент от кавказката раса и се използва широко като модел на първичен колоректален рак. Клетките SW480 притежават епителиоподобна морфология и носят ключови онкогенни мутации, включително KRAS G12V, TP53 R273H и P309S, както и тримбиране на APC, което прави тази линия подходящ модел за изучаване на ролята на Wnt/β-катенин и KRAS сигнализацията при колоректалния рак. Важно е да се отбележи, че SW480 е получена от същия пациент като SW620, но представлява първичния тумор, което позволява сравнителни изследвания на биологията на първичния и метастатичния колоректален рак.

Стабилната интеграция на луцифераза в SW480-Luc позволява чувствително, количествено биолуминесцентно изобразяване (BLI) на туморното натоварване в подкожни и ортотопични модели на ксенографти, използващи имунокомпрометирани приемници. Излъчваният луминесцентен сигнал корелира с броя на жизнеспособните туморни клетки, което подпомага неинвазивното проследяване във времето на приживяването на тумора, кинетиката на растежа и терапевтичния отговор. SW480-Luc се използва широко за in vivo оценка на средства, насочени към KRAS, инхибитори на Wnt пътя и химиотерапевтични режими при колоректален рак, както и за сравнителни проучвания със съответстващата метастатична линия SW620.

SW480-Luc запазва установените молекулярни характеристики на родителската линия SW480, включително мутациите в KRAS, TP53 и APC. Модификацията с луцифераза значително повишава експерименталната производителност и чувствителността при фармакодинамични проучвания in vivo. Изследователите трябва да проверят активността на луциферазата, мутационния профил и кинетиката на растежа при конкретните си експериментални условия, преди да пристъпят към широкомащабно предклинично приложение.

Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Аденокарцином на дебелото черво

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки

04Идентификатори

Източник
SW480-Luc (каталожен номер на Cytion 305698)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_C8Y1

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Епидермален растежен фактор (EGF), кератин (имунопероксидазно оцветяване). Матрилизинът, металопротеиназа, свързана с инвазивността на тумора, не е експресиран.
Експресия на протеини
Протеин P53; Luc2 (светкавица, с оптимизирани кодони)
Експресия на антигена
HLA A2, B8, B17, кръвна група А, Rh+. Luc2 (светкавица, кодон-оптимизиран)
Изоензими
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Мутационен профил
Мутация: p.Gln1338Ter, хомозиготен; Мутация: p.Gly12Val, хомозиготен; Мутация: p.Arg273His, хетерозиготен; Мутация: p.Pro309Ser, хетерозиготен
Вируси
Отрицателна обратна транскриптаза
Податливост към вируси
Човешки имунодефицитен вирус (HIV, LAV)
Продукти
Карциноембрионален антиген (CEA) 0,7 ng/106 клетки/10 дни, кератин, TGF-β. Съобщава се, че клетките произвеждат GM-CSF.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
Ham's F12, w: 1,0 mM стабилен глутамин, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 1,1 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820600a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
1–3 × 10⁴/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контрол на качеството и криоконсервация

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна хранителна среда + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
51 години
Етническа принадлежност
Кавказки