Ir diretamente para o conteúdo
SW480-Luc
Tecido
Cólon
Doença
Adenocarcinoma do cólon

Documentos

SW480-Luc

Cell line · Número do produto 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A SW480-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular humana SW480 de adenocarcinoma do cólon, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental SW480 foi estabelecida a partir de um adenocarcinoma primário do cólon de um doente do sexo masculino, de etnia caucasiana, com 51 anos de idade, e é amplamente utilizada como modelo de cancro colorretal primário. As células SW480 apresentam uma morfologia de tipo epitelial e contêm mutações oncogénicas importantes, incluindo KRAS G12V, TP53 R273H e P309S, bem como um truncamento do APC, tornando esta linha um modelo relevante para o estudo do papel das vias de sinalização Wnt/β-catenina e KRAS no cancro colorretal. É importante referir que a linha SW480 foi derivada do mesmo doente que a linha SW620, mas representa o tumor primário, permitindo estudos comparativos da biologia do cancro colorretal primário em relação ao metastático.

A integração estável da luciferase na SW480-Luc permite a obtenção de imagens de bioluminescência (BLI) sensíveis e quantitativas da carga tumoral em modelos de xenoenxertos subcutâneos e ortotópicos utilizando hospedeiros imunocomprometidos. O sinal luminescente emitido está correlacionado com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal não invasiva do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta terapêutica. A SW480-Luc é amplamente utilizada para a avaliação in vivo de agentes direcionados ao KRAS, inibidores da via Wnt e regimes quimioterapêuticos no cancro colorretal, bem como para estudos comparativos com a linha metastática correspondente SW620.

A SW480-Luc mantém as características moleculares estabelecidas da linha parental SW480, incluindo mutações em KRAS, TP53 e APC. A modificação com luciferase aumenta substancialmente o rendimento experimental e a sensibilidade para estudos farmacodinâmicos in vivo. Os investigadores devem verificar a atividade da luciferase, o perfil mutacional e a cinética de crescimento nas suas condições experimentais específicas antes da utilização pré-clínica em grande escala.

Tecido
Cólon
Doença
Adenocarcinoma do cólon

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
SW480-Luc (número de catálogo da Cytion 305698)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Fator de crescimento epidérmico (EGF), queratina (coloração com imunoperoxidase). A matrilisina, uma metaloproteinase associada à invasividade do tumor, não está expressa.
Expressão proteica
Proteína P53; Luc2 (pirilampo, com códons otimizados)
Expressão do antígeno
HLA A2, B8, B17, grupo sanguíneo A, Rh+. Luc2 (vaga-lume, com códons otimizados)
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Perfil mutacional
Mutação: p.Gln1338Ter, Homozigótico; Mutação: p.Gly12Val, Homozigótico; Mutação: p.Arg273His, Heterozigótico; Mutação: p.Pro309Ser, Heterozigótico
Vírus
Transcriptase reversa negativa
Susceptibilidade ao vírus
Vírus da imunodeficiência humana (VIH, VLA)
Produtos
Antigénio carcinoembrionário (CEA) 0,7 ng/106 células/10 dias, queratina, TGF-β. Foi registado que as células produzem GM-CSF.

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12, com: 1,0 mM de glutamina estável, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 1,1 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820600a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1-3*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
51 anos
Etnia
Caucasiano