Přejít na obsah
SW480-Luc
Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom tlustého střeva

Dokumenty

SW480-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

SW480-Luc je bioluminiscenční derivát lidské buněčné linie SW480 adenokarcinomu tlustého střeva, geneticky upravený tak, aby stabilně exprimoval reportérový gen luciferázy světlušky. Původní buněčná linie SW480 byla izolována z primárního adenokarcinomu tlustého střeva 51letého pacienta kavkazského původu a je široce využívána jako model primárního kolorektálního karcinomu. Buňky SW480 vykazují epiteliální morfologii a nesou klíčové onkogenní mutace, včetně KRAS G12V, TP53 R273H a P309S a zkrácení genu APC, což z této linie činí relevantní model pro studium role signálních drah Wnt/β-katenin a KRAS v kolorektálním karcinomu. Důležité je, že linie SW480 byla odvozena od stejného pacienta jako linie SW620, představuje však primární nádor, což umožňuje srovnávací studie biologie primárního a metastatického kolorektálního karcinomu.

Stabilní integrace luciferázy v linii SW480-Luc umožňuje citlivé, kvantitativní bioluminiscenční zobrazování (BLI) nádorové zátěže v subkutánních a ortotopických modelech xenotransplantátů s využitím imunokompromitovaných hostitelů. Vysílaný luminiscenční signál koreluje s počtem životaschopných nádorových buněk, což umožňuje neinvazivní longitudinální sledování přihojení nádoru, kinetiky růstu a terapeutické odezvy. SW480-Luc se široce používá pro in vivo hodnocení látek zaměřených na KRAS, inhibitorů Wnt signální dráhy a chemoterapeutických režimů u kolorektálního karcinomu, stejně jako pro srovnávací studie s odpovídající metastatickou linií SW620.

SW480-Luc si zachovává zavedené molekulární charakteristiky mateřské linie SW480, včetně mutací v genech KRAS, TP53 a APC. Modifikace pomocí luciferázy podstatně zvyšuje experimentální propustnost a citlivost pro farmakodynamické studie in vivo. Výzkumníci by měli před rozsáhlým předklinickým použitím ověřit aktivitu luciferázy, mutační profil a růstovou kinetiku za svých specifických experimentálních podmínek.

Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom tlustého střeva

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší

04Identifikátory

Citace
SW480-Luc (katalogové číslo Cytion 305698)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Epidermální růstový faktor (EGF), keratin (barvení imunoperoxidázou). Matrilysin, metaloproteináza spojená s invazivitou nádoru, není exprimován.
Exprese proteinů
Protein P53; Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)
Exprese antigenu
HLA A2, B8, B17, krevní skupina A, Rh+. Luc2 (světluška, kodonově optimalizovaný)
Isoenzymy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutační profil
Mutace: p.Gln1338Ter, homozygotní; Mutace: p.Gly12Val, homozygotní; Mutace: p.Arg273His, heterozygotní; Mutace: p.Pro309Ser, heterozygotní
Viry
Reverzní transkriptáza negativní
Náchylnost k virům
Virus lidské imunodeficience (HIV, LAV)
Produkty
Karcinoembryonální antigen (CEA) 0,7 ng/106 buněk/10 dní, keratin, TGF-β. Bylo zjištěno, že buňky produkují GM-CSF.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilní glutamin, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
51 let
Etnická příslušnost
Kavkazský