Mine otse sisu juurde
SW480-Luc
Kude
Colon
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom

Dokumendid

SW480-Luc

Cell line · Toote number 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SW480-Luc on inimese SW480 käärsoole adenokartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib stabiilselt särava liblika lusiferase reportergeeni. Algrakuliin SW480 loodi 51-aastase valge nahavärviga meespatsiendi esmase käärsoole adenokartsinoomi põhjal ning seda kasutatakse laialdaselt esmase kolorektaalvähi mudelina. SW480-rakud näitavad epiteelilaadset morfoloogiat ja sisaldavad olulisi onkogeenseid mutatsioone, sealhulgas KRAS G12V, TP53 R273H ja P309S ning APC-trunkatsiooni, mis teeb sellest liinist asjakohase mudeli Wnt/β-kateniini ja KRAS-signaalimise rolli uurimiseks kolorektaalvähis. Oluline on see, et SW480 pärineb samalt patsiendilt kui SW620, kuid esindab primaartuumorit, võimaldades võrdlevaid uuringuid primaarse ja metastaatilise kolorektaalvähi bioloogia kohta.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon SW480-Luc-is võimaldab tundlikku, kvantitatiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) kasvajakoormuse hindamiseks subkutaansetes ja ortotopilistes ksenotransplantaadi mudelites, kasutades immuunpuudulikkusega peremeesorganisme. Kiiratav luminestsentssignaal korreleerub elujõuliste kasvajarakkude arvuga, toetades kasvaja juurdumise, kasvukineetika ja ravivastuse mitteinvasiivset pikaajalist jälgimist. SW480-Luc'i kasutatakse laialdaselt KRAS-i sihtmärgiks olevate ravimite, Wnt-signaalitee inhibiitorite ja kolorektaalvähi kemoteraapiarežiimide in vivo hindamiseks, samuti võrdlevateks uuringuteks vastava metastaatilise SW620 liiniga.

SW480-Luc säilitab emaliini SW480 väljakujunenud molekulaarsed omadused, sealhulgas KRAS-, TP53- ja APC-mutatsioonid. Lusiferase modifikatsioon suurendab oluliselt eksperimendi läbilaskevõimet ja tundlikkust in vivo farmakodünaamilistes uuringutes. Enne laiaulatuslikku prekliinilist kasutamist peaksid teadlased oma konkreetsetes katsetingimustes kontrollima lusiferase aktiivsust, mutatsiooniprofiili ja kasvukineetikat.

Kude
Colon
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
SW480-Luc (Cytioni katalooginumber 305698)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Epidermise kasvufaktor (EGF), keratiin (immunoperoksüdaasi värvimine). Matrilüsiin, metalloproteinaas, mis on seotud kasvaja invasiivsusega, ei ekspresseeru.
Valgu ekspressioon
P53-valk; Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Antigeeni ekspressioon
HLA A2, B8, B17, veregrupp A, Rh+. Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Gln1338Ter, homosügootne; Mutatsioon: p.Gly12Val, homosügootne; Mutatsioon: p.Arg273His, heterosügootne; Mutatsioon: p.Pro309Ser, heterosügootne
Viirused
Reverse transkriptaasi negatiivne
Viirusele vastuvõtlikkus
Inimese immuunpuudulikkuse viirus (HIV, LAV)
Tooted
Kartsiinoembüooniline antigeen (CEA) 0,7 ng/106 rakku/10 päeva, keratiin, TGF-β. On teatatud, et rakud toodavad GM-CSF-i.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
51 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia