Prejsť na obsah
SW480-Luc
Tkanivo
Colon
Choroba
Adenokarcinóm hrubého čreva

Dokumenty

SW480-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

SW480-Luc je bioluminiscenčný derivát ľudskej bunkovej línie SW480 adenokarcinómu hrubého čreva, geneticky upravený tak, aby stabilne exprimoval reportérový gén luciferázy svätojánskej mušky. Pôvodná bunková línia SW480 bola izolovaná z primárneho adenokarcinómu hrubého čreva 51-ročného pacienta kaukazského pôvodu a je široko používaná ako model primárneho kolorektálneho karcinómu. Bunky SW480 vykazujú epiteliálnu morfológiu a obsahujú kľúčové onkogénne mutácie, vrátane KRAS G12V, TP53 R273H a P309S, ako aj skrátenie génu APC, čo z tejto línie robí relevantný model na štúdium úlohy Wnt/β-katenínovej a KRAS signálnej dráhy pri kolorektálnom karcinóme. Dôležité je, že línie SW480 pochádza od toho istého pacienta ako SW620, avšak reprezentuje primárny nádor, čo umožňuje komparatívne štúdie biológie primárneho a metastatického kolorektálneho karcinómu.

Stabilná integrácia luciferázy v línii SW480-Luc umožňuje citlivé, kvantitatívne bioluminiscenčné zobrazovanie (BLI) nádorovej záťaže v subkutánnych a ortotopických xenotransplantačných modeloch s použitím imunokompromitovaných hostiteľov. Vyžarovaný luminiscenčný signál koreluje s počtom životaschopných nádorových buniek, čo umožňuje neinvazívne longitudinálne sledovanie prihojenia nádoru, kinetiky rastu a terapeutickej odpovede. SW480-Luc sa široko používa na in vivo hodnotenie látok zameraných na KRAS, inhibítorov Wnt dráhy a chemoterapeutických režimov pri kolorektálnom karcinóme, ako aj na komparatívne štúdie s príslušnou metastatickou líniou SW620.

SW480-Luc si zachováva zavedené molekulárne charakteristiky rodičovskej línie SW480, vrátane mutácií génov KRAS, TP53 a APC. Modifikácia luciferázou podstatne zvyšuje experimentálnu priepustnosť a citlivosť pre farmakodynamické štúdie in vivo. Výskumníci by mali pred rozsiahlym predklinickým použitím overiť aktivitu luciferázy, mutačný profil a kinetiku rastu za svojich špecifických experimentálnych podmienok.

Tkanivo
Colon
Choroba
Adenokarcinóm hrubého čreva

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach

04Identifikátory

Citácia
SW480-Luc (katalógové číslo Cytion 305698)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Epidermálny rastový faktor (EGF), keratín (imunoperoxidázové farbenie). Matrilyzín, metaloproteináza spojená s invazívnosťou nádoru, nie je exprimovaný.
Expresia proteínov
Proteín P53; Luc2 (svetluška, s optimalizovanými kodónmi)
Expresia antigénu
HLA A2, B8, B17, krvná skupina A, Rh+. Luc2 (svetluška, s optimalizovanými kodónmi)
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutčný profil
Mutácia: p.Gln1338Ter, homozygot; mutácia: p.Gly12Val, homozygot; mutácia: p.Arg273His, heterozygot; mutácia: p.Pro309Ser, heterozygot
Vírusy
Reverzná transkriptáza negatívna
Náchylnosť na vírusy
Vírus ľudskej imunitnej nedostatočnosti (HIV, LAV)
Produkty
Karcinoembryonálny antigén (CEA) 0,7 ng/106 buniek/10 dní, keratín, TGF-β. Bolo hlásené, že bunky produkujú GM-CSF.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilný glutamín, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion číslo výrobku 820600a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
51 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský