Przejdź do treści
SW480-Luc
Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak okrężnicy

Dokumenty

SW480-Luc

Cell line · Numer produktu 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

SW480-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej SW480 pochodzącej z gruczolakoraka jelita grubego, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa SW480 została wyhodowana z pierwotnego gruczolakoraka jelita grubego 51-letniego pacjenta rasy kaukaskiej i jest szeroko stosowana jako model pierwotnego raka jelita grubego. Komórki SW480 wykazują morfologię podobną do nabłonkowej i zawierają kluczowe mutacje onkogenne, w tym KRAS G12V, TP53 R273H i P309S oraz skrócenie genu APC, co sprawia, że linia ta stanowi odpowiedni model do badania roli szlaków sygnałowych Wnt/β-kateniny i KRAS w raku jelita grubego. Co istotne, linia SW480 pochodzi od tego samego pacjenta co linia SW620, ale reprezentuje nowotwór pierwotny, co umożliwia badania porównawcze biologii pierwotnego raka jelita grubego w porównaniu z rakiem przerzutowym.

Stabilna integracja lucyferazy w linii SW480-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach przeszczepów podskórnych i ortotopowych z wykorzystaniem gospodarzy z obniżoną odpornością. Emitowany sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, umożliwiając nieinwazyjne monitorowanie w czasie długoterminowym wszczepienia guza, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie. Linia SW480-Luc jest szeroko stosowana do oceny in vivo leków ukierunkowanych na gen KRAS, inhibitorów szlaku Wnt oraz schematów chemioterapii w raku jelita grubego, a także do badań porównawczych z dopasowaną linią SW620 o charakterze przerzutowym.

SW480-Luc zachowuje ustalone cechy molekularne macierzystej linii SW480, w tym mutacje genów KRAS, TP53 i APC. Modyfikacja lucyferazowa znacznie zwiększa wydajność eksperymentalną i czułość badań farmakodynamicznych in vivo. Przed zastosowaniem na szeroką skalę w badaniach przedklinicznych naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, profil mutacji oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak okrężnicy

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
SW480-Luc (numer katalogowy Cytion 305698)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Naskórkowy czynnik wzrostu (EGF), keratyna (barwienie immunoperoksydazą). Matrylizyna, metaloproteinaza związana z inwazyjnością guza, nie ulega ekspresji.
Ekspresja białek
Białko P53; Luc2 (świetlik, zoptymalizowane pod kątem kodonów)
Ekspresja antygenu
HLA A2, B8, B17, grupa krwi A, Rh+. Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Profil mutacji
Mutacja: p.Gln1338Ter, homozygotyczna; Mutacja: p.Gly12Val, homozygotyczna; Mutacja: p.Arg273His, heterozygotyczna; Mutacja: p.Pro309Ser, heterozygotyczna
Wirusy
Ujemny wynik odwrotnej transkryptazy
Podatność na wirusy
Ludzki wirus niedoboru odporności (HIV, LAV)
Produkty
Antygen rakowo-płodowy (CEA) 0,7 ng/106 komórek/10 dni, keratyna, TGF-β. Stwierdzono, że komórki wytwarzają GM-CSF.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnej glutaminy, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 1,1 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820600a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
51 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski