SW480-Luc
Cell line · Numer produktu 305698
SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...
Dostosowanie / Zalecenia
- SW480-LucCell line€777.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
SW480-Luc to bioluminescencyjna odmiana ludzkiej linii komórkowej SW480 pochodzącej z gruczolakoraka jelita grubego, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa SW480 została wyhodowana z pierwotnego gruczolakoraka jelita grubego 51-letniego pacjenta rasy kaukaskiej i jest szeroko stosowana jako model pierwotnego raka jelita grubego. Komórki SW480 wykazują morfologię podobną do nabłonkowej i zawierają kluczowe mutacje onkogenne, w tym KRAS G12V, TP53 R273H i P309S oraz skrócenie genu APC, co sprawia, że linia ta stanowi odpowiedni model do badania roli szlaków sygnałowych Wnt/β-kateniny i KRAS w raku jelita grubego. Co istotne, linia SW480 pochodzi od tego samego pacjenta co linia SW620, ale reprezentuje nowotwór pierwotny, co umożliwia badania porównawcze biologii pierwotnego raka jelita grubego w porównaniu z rakiem przerzutowym.
Stabilna integracja lucyferazy w linii SW480-Luc umożliwia czułe, ilościowe obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w modelach przeszczepów podskórnych i ortotopowych z wykorzystaniem gospodarzy z obniżoną odpornością. Emitowany sygnał luminescencyjny koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, umożliwiając nieinwazyjne monitorowanie w czasie długoterminowym wszczepienia guza, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie. Linia SW480-Luc jest szeroko stosowana do oceny in vivo leków ukierunkowanych na gen KRAS, inhibitorów szlaku Wnt oraz schematów chemioterapii w raku jelita grubego, a także do badań porównawczych z dopasowaną linią SW620 o charakterze przerzutowym.
SW480-Luc zachowuje ustalone cechy molekularne macierzystej linii SW480, w tym mutacje genów KRAS, TP53 i APC. Modyfikacja lucyferazowa znacznie zwiększa wydajność eksperymentalną i czułość badań farmakodynamicznych in vivo. Przed zastosowaniem na szeroką skalę w badaniach przedklinicznych naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, profil mutacji oraz kinetykę wzrostu w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.
- Chusteczka
- Colon
- Choroba
- Gruczolakorak okrężnicy
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy
04Identyfikatory
- Źródło
- SW480-Luc (numer katalogowy Cytion 305698)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_C8Y1
05Ekspresja i podatność
- Receptory ulegające ekspresji
- Naskórkowy czynnik wzrostu (EGF), keratyna (barwienie immunoperoksydazą). Matrylizyna, metaloproteinaza związana z inwazyjnością guza, nie ulega ekspresji.
- Ekspresja białek
- Białko P53; Luc2 (świetlik, zoptymalizowane pod kątem kodonów)
- Ekspresja antygenu
- HLA A2, B8, B17, grupa krwi A, Rh+. Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)
- Izoenzymy
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
- Profil mutacji
- Mutacja: p.Gln1338Ter, homozygotyczna; Mutacja: p.Gly12Val, homozygotyczna; Mutacja: p.Arg273His, heterozygotyczna; Mutacja: p.Pro309Ser, heterozygotyczna
- Wirusy
- Ujemny wynik odwrotnej transkryptazy
- Podatność na wirusy
- Ludzki wirus niedoboru odporności (HIV, LAV)
- Produkty
- Antygen rakowo-płodowy (CEA) 0,7 ng/106 komórek/10 dni, keratyna, TGF-β. Stwierdzono, że komórki wytwarzają GM-CSF.
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnej glutaminy, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 1,1 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820600a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- 1–3 × 10⁴/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 51 lat
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
