Preskoči na vsebino
SW480-Luc
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom debelega črevesa

Dokumenti

SW480-Luc

Cell line · Številka izdelka 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

SW480-Luc je bioluminiscenčni derivat človeške celične linije SW480, ki izvira iz adenokarcinoma debelega črevesa, in je bil genetsko spremenjen tako, da stabilno izraža reporterni gen luciferaze svetlečega hrošča. Izvorna celična linija SW480 je bila vzpostavljena iz primarnega adenokarcinoma debelega črevesa 51-letnega belega moškega pacienta in se široko uporablja kot model primarnega kolorektalnega raka. Celice SW480 imajo epitelijsko podobno morfologijo in vsebujejo ključne onkogene mutacije, vključno z KRAS G12V, TP53 R273H in P309S ter skrajšanjem gena APC, zaradi česar je ta linija ustrezen model za preučevanje vloge signalnih poti Wnt/β-katenin in KRAS pri kolorektalnem raku. Pomembno je, da je linija SW480 izvirala iz istega bolnika kot linija SW620, vendar predstavlja primarni tumor, kar omogoča primerjalne študije biologije primarnega in metastatskega kolorektalnega raka.

Stabilna integracija luciferaze v liniji SW480-Luc omogoča občutljivo, kvantitativno bioluminiscenčno slikanje (BLI) tumorske obremenitve v podkožnih in ortotopnih modelih ksenotransplantatov z uporabo imunsko oslabljenih gostiteljev. Izžarevan luminescenčni signal je v korelaciji s številom živih tumorskih celic, kar omogoča neinvazivno longitudinalno spremljanje prijema tumorja, kinetične rasti in terapevtskega odziva. SW480-Luc se široko uporablja za in vivo ocenjevanje zdravil, usmerjenih v KRAS, zaviralcev Wnt-signalne poti in kemoterapevtskih režimov pri kolorektalnem raku, pa tudi za primerjalne študije z ustrezno metastazno linijo SW620.

SW480-Luc ohranja uveljavljene molekularne značilnosti izvorne linije SW480, vključno z mutacijami genov KRAS, TP53 in APC. Modifikacija z luciferazo bistveno poveča eksperimentalno zmogljivost in občutljivost za farmakodinamične študije in vivo. Raziskovalci morajo pred obsežno predklinično uporabo preveriti aktivnost luciferaze, profil mutacij in kinetično rast v svojih specifičnih eksperimentalnih pogojih.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom debelega črevesa

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
SW480-Luc (kataloška številka Cytion 305698)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Epidermalni rastni faktor (EGF), keratin (imunoperoksidazno barvanje). Matrilizin, metaloproteinaza, povezana z invazivnostjo tumorjev, ni izražen.
Ekspresija beljakovin
Protein P53; Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimiziran)
Ekspresija antigena
HLA A2, B8, B17, krvna skupina A, Rh+. Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirano)
Izoenzimi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Profil mutacij
Mutacija: p.Gln1338Ter, homozigotna; mutacija: p.Gly12Val, homozigotna; mutacija: p.Arg273His, heterozigotna; mutacija: p.Pro309Ser, heterozigotna
Virusi
Reverzna transkriptaza negativna
Občutljivost na virus
Virus človeške imunske pomanjkljivosti (HIV, LAV)
Izdelki
Karcinoembrionalni antigen (CEA) 0,7 ng/106 celic/10 dni, keratin, TGF-β. Celice naj bi proizvajale GM-CSF.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnega glutamina, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,1 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820600a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
51 let
Etnična pripadnost
Kavkaški