Skip to content
SW480-Luc
Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư tuyến đại tràng

Documents

SW480-Luc

Cell line · Product number 305698

SW480-Luc is a bioluminescent derivative of the human SW480 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gen...

€777.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

SW480-Luc là một biến thể phát quang sinh học của dòng tế bào ung thư biểu mô tuyến đại tràng SW480 ở người, được biến đổi gen để biểu hiện ổn định gen báo cáo luciferase của đom đóm. Dòng tế bào SW480 gốc được thiết lập từ một khối u ung thư tuyến đại tràng nguyên phát của một bệnh nhân nam da trắng 51 tuổi và được sử dụng rộng rãi làm mô hình cho ung thư đại trực tràng nguyên phát. Các tế bào SW480 có hình thái giống biểu mô và mang các đột biến gây ung thư quan trọng bao gồm KRAS G12V, TP53 R273H và P309S, cũng như sự cắt ngắn APC, khiến dòng tế bào này trở thành mô hình phù hợp để nghiên cứu vai trò của tín hiệu Wnt/β-catenin và KRAS trong ung thư đại trực tràng. Điều quan trọng là, dòng SW480 được phân lập từ cùng một bệnh nhân với dòng SW620 nhưng đại diện cho khối u nguyên phát, cho phép thực hiện các nghiên cứu so sánh về sinh học của ung thư đại trực tràng nguyên phát so với di căn.

Việc tích hợp luciferase ổn định trong SW480-Luc cho phép chụp ảnh sinh quang (BLI) nhạy cảm và định lượng khối u trong các mô hình cấy ghép dưới da và tại chỗ sử dụng vật chủ suy giảm miễn dịch. Tín hiệu phát quang phát ra tương quan với số lượng tế bào khối u còn sống, hỗ trợ việc theo dõi theo chiều dọc không xâm lấn về sự cấy ghép khối u, động học tăng trưởng và phản ứng điều trị. SW480-Luc được sử dụng rộng rãi để đánh giá in vivo các tác nhân nhắm mục tiêu KRAS, chất ức chế con đường Wnt và các phác đồ hóa trị trong ung thư đại trực tràng, cũng như cho các nghiên cứu so sánh với dòng SW620 di căn tương ứng.

SW480-Luc vẫn giữ được các đặc tính phân tử đã được xác định của dòng SW480 gốc, bao gồm các đột biến KRAS, TP53 và APC. Sự biến đổi luciferase giúp tăng cường đáng kể năng suất và độ nhạy của thí nghiệm cho các nghiên cứu dược động học in vivo. Các nhà nghiên cứu nên xác minh hoạt tính luciferase, hồ sơ đột biến và động học tăng trưởng trong các điều kiện thí nghiệm cụ thể của họ trước khi sử dụng trên quy mô lớn trong giai đoạn tiền lâm sàng.

Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư tuyến đại tràng

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude

04Identifiers

Citation
SW480-Luc (Mã sản phẩm Cytion 305698)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_C8Y1

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF), keratin (nhuộm bằng phương pháp immunoperoxidase). Matrilysin, một metalloproteinase liên quan đến khả năng xâm lấn của khối u, không được biểu hiện.
Protein expression
Protein P53; Luc2 (đom đóm, đã được tối ưu hóa mã hóa)
Antigen expression
HLA A2, B8, B17, nhóm máu A, Rh+. Luc2 (đom đóm, tối ưu hóa codon)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1, 6PGD, A, PEP-D, 1, ES-D, 1
Mutational profile
Biến dị: p.Gln1338Ter, đồng hợp tử; Biến dị: p.Gly12Val, đồng hợp tử; Biến dị: p.Arg273His, dị hợp tử; Biến dị: p.Pro309Ser, dị hợp tử
Viruses
Âm tính với enzyme sao chép ngược
Virus susceptibility
Virus suy giảm miễn dịch ở người (HIV, LAV)
Products
Kháng nguyên ung thư phôi (CEA) 0,7 ng/10⁶ tế bào/10 ngày, keratin, TGF-β. Các tế bào được báo cáo là sản xuất GM-CSF.

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, chứa: 1,0 mM glutamine ổn định, chứa: 1,0 mM natri pyruvate, chứa: 1,1 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 3
Seeding density
1–3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
51 năm
Ethnicity
Người da trắng