Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Les cellules HEK293 stables-Rpn11-HTBH constituent un dérivé transfecté de manière stable de la lignée cellulaire HEK293 (Human Embryonic Kidney 293), conçue pour exprimer une version marquée de Rpn11 (également connue sous le nom de PSMD14 ou POH1), la sous-unité déubiquitinase du complexe de couvercle du protéasome 26S. Rpn11 est une déubiquitinase à domaine JAMM dépendante du Zn²⁺ qui élimine les chaînes d’ubiquitine des substrats liés au protéasome au cours de la dégradation protéasomale. Le marqueur HTBH (hexahistidine-TEV-peptide accepteur de biotine-hexahistidine) permet la purification par affinité des complexes contenant Rpn11 dans des conditions natives, ce qui rend cette lignée particulièrement adaptée à la purification des complexes protéasomaux et aux études d’interactome.

Cette lignée cellulaire peut être utilisée dans des études portant sur la biologie du protéasome 26S, la régulation de la voie ubiquitine-protéasome (UPS), la fonction de Rpn11/PSMD14 dans le contrôle de la qualité des protéines, l’assemblage et la dynamique du protéasome, ainsi que le mécanisme d’action des inhibiteurs du protéasome. Elle est également utilisée pour la purification par affinité de complexes protéasomiques natifs et comme modèle pour l’étude de la biologie des déubiquitinases dans le contexte du protéasome. Le système de marquage HTBH permet une purification très rigoureuse des complexes biotinylés à l’aide de pulldowns à base de streptavidine.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.