Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabila HEK293-celler – Rpn11-HTBH är en stabilt transfekterad variant av cellinjen HEK293 (Human Embryonic Kidney 293), som har modifierats för att uttrycka en märkt version av Rpn11 (även känt som PSMD14 eller POH1), deubiquitinas-subenheten i 26S-proteasomets lockkomplex. Rpn11 är ett Zn²⁺-beroende deubiquitinase med JAMM-domän som avlägsnar ubiquitin-kedjor från proteasombundna substrat under proteasomal nedbrytning. HTBH-taggen (hexahistidin-TEV-biotinacceptorpeptid-hexahistidin) möjliggör affinitetsrening av Rpn11-innehållande komplex under naturliga förhållanden, vilket gör denna cellinje särskilt lämplig för rening av proteasomkomplex och interaktomstudier.

Denna cellinje är användbar i studier av 26S-proteasombiologi, reglering av ubiquitin-proteasomvägen (UPS), Rpn11/PSMD14-funktionen vid proteinkvalitetskontroll, proteasomets sammansättning och dynamik samt verkningsmekanismen hos proteasomhämmare. Den används även för affinitetsrening av nativa proteasomkomplex och som modell för att studera deubiquitinase-biologi i samband med proteasomet. HTBH-märkningssystemet möjliggör mycket noggrann rening av biotinylerade komplex med hjälp av streptavidinbaserade pulldowns.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring