Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

A stabil HEK293-sejtek – Rpn11-HTBH a HEK293 (Human Embryonic Kidney 293) sejtvonal stabilan transzfektált származéka, amelyet úgy alakítottak ki, hogy a 26S proteaszóm fedélkomplexének deubiquitináz alegységét, az Rpn11-et (más néven PSMD14 vagy POH1) jelölt változatban fejezze ki. Az Rpn11 egy Zn²⁺-függő, JAMM-doménnel rendelkező deubiquitináz, amely a proteaszomális lebontás során eltávolítja az ubiquitin-láncokat a proteaszomhoz kötődött szubsztrátokról. A HTBH-címke (hexahisztidin-TEV-biotin-akceptor-peptid-hexahisztidin) lehetővé teszi az Rpn11-t tartalmazó komplexek affinitásos tisztítását natív körülmények között, így ez a sejtvonal különösen alkalmas proteaszóm-komplexek tisztítására és interaktom-vizsgálatokra.

Ez a sejtvonal alkalmazható a 26S proteaszóm biológiájának, az ubikvitin-proteaszóm útvonal (UPS) szabályozásának, az Rpn11/PSMD14 fehérje minőség-ellenőrzésben betöltött szerepének, a proteaszóm összeállításának és dinamikájának, valamint a proteaszóm-gátlók hatásmechanizmusának vizsgálatában. Emellett natív proteaszóm-komplexek affinitásos tisztítására is használják, valamint modellként szolgál a deubikvitinázok biológiájának a proteaszóm kontextusában történő vizsgálatához. A HTBH-címkéző rendszer lehetővé teszi a biotinilált komplexek rendkívül szigorú tisztítását streptavidin-alapú pulldown-eljárások alkalmazásával.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban