Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabilné bunky HEK293-Rpn11-HTBH sú stabilne transfekovaným derivátom bunkovej línie HEK293 (ľudská embryonálna oblička 293), geneticky upravené tak, aby exprimovali značenú verziu Rpn11 (známeho aj ako PSMD14 alebo POH1), podjednotky deubiquitinázy komplexu viečka 26S proteazómu. Rpn11 je Zn²⁺-dependentná deubikvitináza s doménou JAMM, ktorá odstraňuje reťazce ubikvitínu zo substrátov viazaných na proteazóm počas proteazómovej degradácie. Značka HTBH (hexahistidín-TEV-biotínový akceptorový peptid-hexahistidín) umožňuje afinitnú purifikáciu komplexov obsahujúcich Rpn11 za natívnych podmienok, vďaka čomu je táto bunková línia obzvlášť vhodná na purifikáciu proteazómových komplexov a štúdium interaktómu.

Táto bunková línia je vhodná na štúdium biológie 26S proteazómu, regulácie ubikvitín-proteazómovej dráhy (UPS), funkcie Rpn11/PSMD14 pri kontrole kvality proteínov, zostavovania a dynamiky proteazómu, ako aj mechanizmu účinku inhibítorov proteazómu. Používa sa tiež na afinitnú purifikáciu natívnych proteazómových komplexov a ako model na štúdium biológie deubikvitinázy v kontexte proteazómu. Systém značenia HTBH umožňuje vysoko selektívnu purifikáciu biotinylovaných komplexov pomocou pulldownov na báze streptavidínu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke