Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Стабилните HEK293-Rpn11-HTBH клетки са стабилно трансфектиран дериват на клетъчната линия HEK293 (Human Embryonic Kidney 293), модифицирана да експресира маркирана версия на Rpn11 (известен също като PSMD14 или POH1) – деубиквитиназната субединица на капачния комплекс на 26S протеазомата. Rpn11 е Zn²⁺-зависима деубиквитиназа с JAMM-домейн, която отстранява убиквитинови вериги от субстрати, свързани с протеазомата, по време на протеазомната деградация. HTBH-маркерът (хексахистидин-TEV-биотин-акцепторен пептид-хексахистидин) позволява афинитетно пречистване на комплекси, съдържащи Rpn11, при естествени условия, което прави тази клетъчна линия особено подходяща за пречистване на протеазомни комплекси и изследвания на интерактома.

Тази клетъчна линия намира приложение в изследвания на биологията на 26S протеазомата, регулацията на убиквитин-протеазомния път (UPS), функцията на Rpn11/PSMD14 в контрола на качеството на протеините, сглобяването и динамиката на протеазомата, както и механизма на действие на протеазомните инхибитори. Тя се използва също за афинитетно пречистване на нативни протеазомни комплекси и като модел за изучаване на биологията на деубиквитиназите в контекста на протеазомата. Системата за маркиране HTBH позволява изключително строго пречистване на биотинилирани комплекси чрез пулдауни на базата на стрептавидин.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация