Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabile HEK293-Zellen – Rpn11-HTBH sind ein stabil transfiziertes Derivat der HEK293 (Human Embryonic Kidney 293)-Zelllinie, die so modifiziert wurde, dass sie eine markierte Version von Rpn11 (auch bekannt als PSMD14 oder POH1) exprimiert, der Deubiquitinase-Untereinheit des 26S-Proteasom-Lid-Komplexes. Rpn11 ist eine Zn²⁺-abhängige Deubiquitinase mit JAMM-Domäne, die während des proteasomalen Abbaus Ubiquitin-Ketten von proteasomgebundenen Substraten entfernt. Das HTBH-Tag (Hexahistidin-TEV-Biotin-Akzeptorpeptid-Hexahistidin) ermöglicht die Affinitätsaufreinigung von Rpn11-haltigen Komplexen unter nativen Bedingungen, wodurch sich diese Zelllinie besonders gut für die Aufreinigung von Proteasomkomplexen und Interaktomstudien eignet.

Diese Zelllinie eignet sich für Untersuchungen zur Biologie des 26S-Proteasoms, zur Regulation des Ubiquitin-Proteasom-Wegs (UPS), zur Funktion von Rpn11/PSMD14 bei der Proteinqualitätskontrolle, zum Aufbau und zur Dynamik des Proteasoms sowie zum Wirkmechanismus von Proteasom-Inhibitoren. Sie wird zudem zur Affinitätsaufreinigung nativer Proteasomkomplexe sowie als Modell zur Untersuchung der Deubiquitinase-Biologie im Zusammenhang mit dem Proteasom verwendet. Das HTBH-Tagging-System ermöglicht eine hochselektive Aufreinigung biotinylierter Komplexe mittels Streptavidin-basierter Pulldowns.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung