Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Tế bào HEK293 ổn định-Rpn11-HTBH là một dòng tế bào biến đổi gen ổn định có nguồn gốc từ dòng tế bào HEK293 (Tế bào thận phôi người 293), được thiết kế để biểu hiện phiên bản có gắn thẻ của Rpn11 (còn được gọi là PSMD14 hoặc POH1), tiểu đơn vị deubiquitinase của phức hợp nắp proteasome 26S. Rpn11 là một enzym khử ubiquitin có miền JAMM phụ thuộc vào Zn²⁺, có chức năng loại bỏ các chuỗi ubiquitin khỏi các chất nền liên kết với proteasome trong quá trình phân hủy bằng proteasome. Thẻ HTBH (hexahistidine-TEV-peptide chấp nhận biotin-hexahistidine) cho phép tinh chế bằng ái lực các phức hợp chứa Rpn11 trong điều kiện tự nhiên, khiến dòng tế bào này đặc biệt phù hợp cho việc tinh chế phức hợp proteasome và nghiên cứu tương tác protein.

Dòng tế bào này có thể được áp dụng trong các nghiên cứu về sinh học proteasome 26S, điều hòa con đường ubiquitin-proteasome (UPS), chức năng của Rpn11/PSMD14 trong kiểm soát chất lượng protein, quá trình lắp ráp và động học của proteasome, cũng như cơ chế tác động của các chất ức chế proteasome. Nó cũng được sử dụng để tinh chế bằng phương pháp liên kết các phức hợp proteasome ở trạng thái tự nhiên và làm mô hình nghiên cứu sinh học deubiquitinase trong bối cảnh proteasome. Hệ thống gắn thẻ HTBH cho phép tinh chế các phức hợp được biotin hóa với độ chính xác cao bằng phương pháp kéo xuống dựa trên streptavidin.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.