Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabiele HEK293-cellen-Rpn11-HTBH is een stabiel getransfecteerde afgeleide van de HEK293 (Human Embryonic Kidney 293)-cellijn, die is gemanipuleerd om een gelabelde versie van Rpn11 (ook bekend als PSMD14 of POH1) tot expressie te brengen, de deubiquitinase-subeenheid van het 26S-proteasoom-dekselcomplex. Rpn11 is een Zn²⁺-afhankelijk deubiquitinase met een JAMM-domein dat ubiquitineketens verwijdert van aan het proteasoom gebonden substraten tijdens proteasoomafbraak. De HTBH-tag (hexahistidine-TEV-biotine-acceptorpeptide-hexahistidine) maakt affiniteitszuivering van Rpn11-bevattende complexen onder natuurlijke omstandigheden mogelijk, waardoor deze lijn bijzonder geschikt is voor de zuivering van proteasoomcomplexen en interactoomonderzoek.

Deze cellijn is toepasbaar in onderzoek naar de biologie van het 26S-proteasoom, de regulatie van de ubiquitine-proteasoomroute (UPS), de functie van Rpn11/PSMD14 bij de kwaliteitscontrole van eiwitten, de assemblage en dynamica van het proteasoom, en het werkingsmechanisme van proteasoomremmers. De lijn wordt ook gebruikt voor affiniteitszuivering van natieve proteasoomcomplexen en als model voor het bestuderen van de biologie van deubiquitinases in de context van het proteasoom. Het HTBH-tagging-systeem maakt een zeer stringente zuivering van biotine-gelabelde complexen mogelijk met behulp van op streptavidine gebaseerde pulldowns.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring