Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Τα σταθερά κύτταρα HEK293-Rpn11-HTBH αποτελούν ένα σταθερά μεταμοσχευμένο παράγωγο της κυτταρικής σειράς HEK293 (Human Embryonic Kidney 293), που έχει τροποποιηθεί γενετικά ώστε να εκφράζει μια επισημασμένη έκδοση του Rpn11 (γνωστού επίσης ως PSMD14 ή POH1), της υπομονάδας της δεουβικουτινάσης του συμπλέγματος καπακιού του πρωτεασώματος 26S. Το Rpn11 είναι μια εξαρτώμενη από Zn²⁺ δεουβικουτινάση με τομέα JAMM, η οποία απομακρύνει τις αλυσίδες ουβικιτίνης από υποστρώματα που έχουν συνδεθεί με το πρωτεάσωμα κατά τη διάρκεια της πρωτεασωματικής αποικοδόμησης. Η ετικέτα HTBH (εξαϊστιδίνη-TEV-πεπτίδιο δέκτη βιοτίνης-εξαϊστιδίνη) επιτρέπει τον καθαρισμό με βάση τη συγγένεια συμπλοκών που περιέχουν Rpn11 υπό φυσιολογικές συνθήκες, καθιστώντας αυτή τη σειρά κυττάρων ιδιαίτερα κατάλληλη για τον καθαρισμό συμπλοκών πρωτεασώματος και για μελέτες αλληλεπιδράσεων.

Αυτή η κυτταρική σειρά μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε μελέτες της βιολογίας του πρωτεασώματος 26S, της ρύθμισης της οδού ουβικιτίνης-πρωτεασώματος (UPS), της λειτουργίας των Rpn11/PSMD14 στον έλεγχο ποιότητας των πρωτεϊνών, της συναρμολόγησης και της δυναμικής του πρωτεασώματος, καθώς και του μηχανισμού δράσης των αναστολέων του πρωτεασώματος. Χρησιμοποιείται επίσης για τον καθαρισμό με συγγένεια φυσικών συμπλοκών πρωτεασώματος και ως μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας των δεουβικουτινασών στο πλαίσιο του πρωτεασώματος. Το σύστημα σήμανσης HTBH επιτρέπει τον εξαιρετικά αυστηρό καθαρισμό βιοτινυλιωμένων συμπλοκών με τη χρήση μεθόδων απομόνωσης με βάση τη στρεπταβιδίνη.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης