Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Le cellule HEK293 stabili-Rpn11-HTBH sono un derivato trasfettato in modo stabile della linea cellulare HEK293 (Human Embryonic Kidney 293), ingegnerizzata per esprimere una versione marcata di Rpn11 (nota anche come PSMD14 o POH1), la subunità deubiquitinasi del complesso "lid" del proteasoma 26S. Rpn11 è una deubiquitinasi con dominio JAMM Zn²⁺-dipendente che rimuove le catene di ubiquitina dai substrati legati al proteasoma durante la degradazione proteasomica. Il tag HTBH (esaistidina-TEV-peptide accettore di biotina-esaistidina) consente la purificazione per affinità dei complessi contenenti Rpn11 in condizioni native, rendendo questa linea particolarmente adatta alla purificazione dei complessi proteasomiali e agli studi sull’interactoma.

Questa linea cellulare è applicabile negli studi sulla biologia del proteasoma 26S, sulla regolazione della via ubiquitina-proteasoma (UPS), sulla funzione di Rpn11/PSMD14 nel controllo di qualità delle proteine, sull’assemblaggio e sulle dinamiche del proteasoma e sul meccanismo d’azione degli inibitori del proteasoma. Viene inoltre utilizzata per la purificazione per affinità di complessi proteasomici nativi e come modello per lo studio della biologia delle deubiquitinasi nel contesto del proteasoma. Il sistema di tagging HTBH consente una purificazione altamente rigorosa dei complessi biotinilati mediante pulldown basati sulla streptavidina.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia