Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabiilsed HEK293-rakud – Rpn11-HTBH on HEK293 (Human Embryonic Kidney 293) rakuliini stabiilselt transfekteeritud derivaat, mis on loodud ekspresseerima märgistatud versiooni Rpn11-st (tuntud ka kui PSMD14 või POH1), mis on 26S proteasoomi kaanekompleksi deubikvitinaasi alarühm. Rpn11 on Zn²⁺-sõltuv JAMM-domeeniga deubikvitinaas, mis eemaldab proteasoomiga seotud substraatidelt ubikvitiiniahelad proteasoomse lagundamise käigus. HTBH-märgis (heksahistidiin-TEV-biotiini aktseptorpeptiid-heksahistidiin) võimaldab Rpn11-d sisaldavate komplekside afiinset puhastamist loomulikes tingimustes, mistõttu sobib see rakuliin eriti hästi proteasoomi komplekside puhastamiseks ja interaktome uuringuteks.

Seda rakuliini saab kasutada 26S proteasoomi bioloogia, ubikvitiin-proteasoomi rada (UPS) regulatsiooni, Rpn11/PSMD14 funktsiooni valkude kvaliteedikontrollis, proteasoomi kokkupaneku ja dünaamika ning proteasoomi inhibiitorite toimemehhanismi uurimisel. Seda kasutatakse ka natiivse proteasoomi komplekside afiinsuspuhastamiseks ning mudelina deubikvitiinaasi bioloogia uurimiseks proteasoomi kontekstis. HTBH-märgistamissüsteem võimaldab biotiniilitud komplekside väga ranget puhastamist streptavidiinipõhiste pulldown-meetodite abil.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest