Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabilios HEK293 ląstelės – Rpn11-HTBH – yra stabiliai transfekuotas HEK293 (žmogaus embrioninių inkstų 293) ląstelių linijos atmaina, sukurta taip, kad ekspresuotų pažymėtą Rpn11 (taip pat žinomo kaip PSMD14 arba POH1) versiją – 26S proteasomos dangčio komplekso deubikvitinazės subvienetą. Rpn11 yra Zn²⁺ priklausomas JAMM domeno deubikvitinazė, kuri proteasominio skilimo metu pašalina ubikvitino grandines iš su proteasomu susietų substratų. HTBH žymė (heksahistidinas-TEV-biotino akceptoriaus peptidas-heksahistidinas) leidžia atlikti Rpn11 turinčių kompleksų afinitetinį gryninimą natūraliomis sąlygomis, todėl ši ląstelių linija ypač tinka proteasomų kompleksų gryninimui ir sąveikų tinklo tyrimams.

Ši ląstelių linija tinka 26S proteasomos biologijos, ubikvitino-proteasomos kelio (UPS) reguliacijos, Rpn11/PSMD14 funkcijos baltymų kokybės kontrolei, proteasomos surinkimo ir dinamikos bei proteasomos inhibitorių veikimo mechanizmo tyrimams. Ji taip pat naudojama natūralių proteasomų kompleksų afinitetiniam gryninimui ir kaip modelis deubikvitinazės biologijos tyrimams proteasomų kontekste. HTBH žymėjimo sistema leidžia atlikti itin griežtą biotinuotų kompleksų gryninimą naudojant streptavidino pagrįstus pulldown metodus.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime