Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

เซลล์ HEK293 ที่ถูกดัดแปลงอย่างคงที่ - Rpn11-HTBH เป็นสายพันธุ์ที่ผ่านการดัดแปลงอย่างคงที่ของเซลล์ HEK293 (Human Embryonic Kidney 293) ที่ได้รับการดัดแปลงให้แสดงออกเวอร์ชันที่มีแท็กของ Rpn11 (ยังรู้จักในชื่อ PSMD14 หรือ POH1) ซึ่งเป็นหน่วยย่อยของเอนไซม์เดอูบิควิตินาเซในคอมเพล็กซ์ฝาปิดของโปรตีโอโซม 26S Rpn11 เป็นเอนไซม์เดอูบิควิตินาเซที่ขึ้นอยู่กับ Zn²⁺ และมีโดเมน JAMM ซึ่งทำหน้าที่กำจัดโซ่ยูบิควิตินออกจากซับสเตรตที่ผูกกับโปรตีโอโซมระหว่างกระบวนการสลายโปรตีนโดยโปรตีโอโซม แท็ก HTBH (hexahistidine-TEV-biotin acceptor peptide-hexahistidine) ช่วยให้สามารถทำการแยกด้วยวิธีความผูกพัน (affinity purification) ของคอมเพล็กซ์ที่มี Rpn11 อยู่ภายใต้สภาวะธรรมชาติได้ ทำให้สายเซลล์นี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการแยกคอมเพล็กซ์โปรเทาโซมและการศึกษาปฏิสัมพันธ์ของโปรตีน (interactome studies)

สายเซลล์นี้สามารถนำไปใช้ในการศึกษาชีววิทยาของโปรเทาโซม 26S การควบคุมทางเดินยูบิควิติน-โปรเทาโซม (UPS) หน้าที่ของ Rpn11/PSMD14 ในการควบคุมคุณภาพโปรตีน การประกอบและพลวัตของโปรเทาโซม รวมถึงกลไกการทำงานของสารยับยั้งโปรเทาโซม นอกจากนี้ยังใช้สำหรับการแยกด้วยวิธีความผูกพันของคอมเพล็กซ์โปรเทาโซมในสภาพธรรมชาติ และเป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเดอยูบิควิตินาเซในบริบทของโปรเทาโซม ระบบแท็ก HTBH ช่วยให้สามารถแยกคอมเพล็กซ์ที่ถูกไบโอทินิลเลตได้อย่างเข้มงวดสูง โดยใช้เทคนิคการดึงลง (pulldown) ที่ใช้สเตรปตาวิดินเป็นฐาน

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.