Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabilās HEK293 šūnas — Rpn11-HTBH — ir stabili transfekcijas ceļā modificēts HEK293 (cilvēka embrija nieres 293) šūnu līnijas stabili transfekcijas ceļā iegūts atvasinājums, kas inženierijas ceļā radīts, lai ekspresētu marķētu Rpn11 (pazīstams arī kā PSMD14 vai POH1) versiju — 26S proteasomas vāka kompleksa deubikvitināzes apakšvienību. Rpn11 ir Zn²⁺-atkarīga JAMM-domēna deubikvitināze, kas proteasomālās noārdīšanās laikā no proteasomai piesaistītiem substrātiem noņem ubikvitīna ķēdes. HTBH marķējums (heksahistidīns-TEV-biotīna akceptora peptīds-heksahistidīns) ļauj veikt Rpn11 saturošo kompleksu afinitātes attīrīšanu dabiskos apstākļos, padarot šo šūnu līniju īpaši piemērotu proteasomu kompleksu attīrīšanai un interaktomu pētījumiem.

Šo šūnu līniju var izmantot 26S proteasomas bioloģijas pētījumos, ubikvitīna-proteasomas ceļa (UPS) regulācijas pētījumos, Rpn11/PSMD14 funkcijas pētījumos olbaltumvielu kvalitātes kontrolē, proteasomas montāžas un dinamikas pētījumos, kā arī proteasomas inhibitoru darbības mehānisma izpētē. To izmanto arī dabisko proteasomu kompleksu afinitātes attīrīšanai un kā modeli deubikvitināzes bioloģijas pētīšanai proteasomas kontekstā. HTBH marķēšanas sistēma ļauj veikt ļoti precīzu biotinilēto kompleksu attīrīšanu, izmantojot uz streptavidīnu balstītus pulldown eksperimentus.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu