Stable HEK293 Cells-Rpn11-HTBH

Stabilne celice HEK293-Rpn11-HTBH so stabilno transfektirana derivata celične linije HEK293 (človeške embrionalne ledvice 293), ki je bila genetsko spremenjena za izražanje označene različice Rpn11 (znanega tudi kot PSMD14 ali POH1), podenote deubikvitinaze kompleksa pokrova 26S proteasoma. Rpn11 je Zn²⁺-odvisna deubikvitinaza z domeno JAMM, ki med proteasomsko razgradnjo odstranjuje verige ubikvitina s substratov, vezanih na proteasom. Oznaka HTBH (heksahistidin-TEV-biotin-akceptorski peptid-heksahistidin) omogoča afinitetno čiščenje kompleksov, ki vsebujejo Rpn11, v naravnih pogojih, zaradi česar je ta linija še posebej primerna za čiščenje proteasomskih kompleksov in študije interaktoma.

To celično linijo je mogoče uporabiti v raziskavah biologije 26S proteasoma, regulacije ubikvitin-proteasomskega poteka (UPS), funkcije Rpn11/PSMD14 pri nadzoru kakovosti beljakovin, sestavljanja in dinamike proteasoma ter mehanizma delovanja zaviralcev proteasoma. Uporablja se tudi za afinitetno čiščenje naravnih proteasomskih kompleksov ter kot model za preučevanje biologije deubikvitinaz v kontekstu proteasoma. Sistem označevanja HTBH omogoča izredno strogo čiščenje biotiniliranih kompleksov s pomočjo pulldownov na osnovi streptavidina.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo