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M14
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome amélanotique
Site métastatique
Fesse droite, hypoderme
Synonymes
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Documents

M14

Cell line · Référence du produit 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire M14 est une lignée cellulaire de mélanome humain dérivée d'une lésion cutanée métastatique d'un patient adulte atteint de mélanome. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans la recherche sur le cancer, en particulier dans l'étude de la biologie du mélanome, de la progression tumorale et de l'évaluation d'agents thérapeutiques potentiels. Les cellules M14 présentent des caractéristiques typiques du mélanome malin, notamment la capacité de former des tumeurs chez des souris immunodéprimées, ce qui en fait un outil précieux pour les études in vivo en plus des expériences in vitro.

En termes de caractéristiques moléculaires, les cellules M14 sont porteuses de mutations dans des gènes fréquemment altérés dans le mélanome, notamment le gène BRAF. Plus précisément, les cellules M14 sont porteuses de la mutation BRAF V600E, qui entraîne une activation constitutive de la voie de signalisation MAPK/ERK, favorisant la prolifération et la survie des cellules. Cela fait de M14 un modèle important pour l'étude des thérapies ciblées, telles que les inhibiteurs de BRAF, qui sont conçues pour exploiter cette mutation. En outre, les cellules M14 ont été utilisées dans la recherche sur l'immunothérapie en raison de leur expression de divers antigènes associés au mélanome et de leur sensibilité à la modulation du système immunitaire.

Les chercheurs qui utilisent la lignée cellulaire M14 doivent savoir que ces cellules ne conviennent pas à des applications thérapeutiques et sont destinées uniquement à des fins de recherche, en particulier celles qui se concentrent sur la pathophysiologie du mélanome, le criblage de médicaments et le développement de nouvelles stratégies thérapeutiques. La lignée cellulaire M14 reste une ressource clé pour faire progresser notre compréhension du mélanome et explorer de nouvelles voies de traitement.

Tissu
Peau
Maladie
Mélanome amélanotique
Site métastatique
Fesse droite, hypoderme
Synonymes
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique

04Identifiants

Référence
M14 (numéro de catalogue Cytion 302163)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
33
Origine ethnique
Européen