M14

La linea cellulare M14 è una linea cellulare di melanoma umano derivata da una lesione cutanea metastatica di un paziente adulto affetto da melanoma. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro, in particolare nello studio della biologia del melanoma, della progressione tumorale e nella valutazione di potenziali agenti terapeutici. Le cellule M14 presentano caratteristiche tipiche del melanoma maligno, tra cui la capacità di formare tumori in topi immunocompromessi, il che le rende uno strumento prezioso per studi in vivo oltre che per esperimenti in vitro.

In termini di caratteristiche molecolari, è stato riportato che le cellule M14 sono portatrici di mutazioni in geni che sono frequentemente alterati nel melanoma, compreso il gene BRAF. In particolare, le cellule M14 ospitano la mutazione BRAF V600E, che porta all'attivazione costitutiva della via di segnalazione MAPK/ERK, promuovendo la proliferazione e la sopravvivenza delle cellule. Ciò rende le M14 un modello importante per lo studio di terapie mirate, come gli inibitori di BRAF, progettate per sfruttare questa mutazione. Inoltre, le cellule M14 sono state utilizzate nella ricerca sull'immunoterapia grazie alla loro espressione di vari antigeni associati al melanoma e alla loro suscettibilità alla modulazione del sistema immunitario.

I ricercatori che utilizzano la linea cellulare M14 devono tenere presente che queste cellule non sono adatte per applicazioni terapeutiche e sono destinate esclusivamente a scopi di ricerca, in particolare quelli incentrati sulla fisiopatologia del melanoma, sullo screening dei farmaci e sullo sviluppo di nuove strategie terapeutiche. La linea cellulare M14 rimane una risorsa fondamentale per far progredire la nostra comprensione del melanoma e per esplorare nuove vie di trattamento.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia