الانتقال إلى المحتوى
M14
الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني الأميلاني
موقع الانتشار
الأرداف الأيمن، تحت الجلد الأيمن
المرادفات
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

المستندات

M14

Cell line · رقم المنتج 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط الخلايا M14 هو خط خلايا الورم الميلانيني البشري المشتق من آفة جلدية منتشرة لمريض بالغ مصاب بالورم الميلانيني. يُستخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في أبحاث السرطان، خاصةً في دراسة بيولوجيا الورم الميلانيني وتطور الورم وتقييم العوامل العلاجية المحتملة. تُظهر خلايا M14 خصائص نموذجية للورم الميلانيني الخبيث، بما في ذلك القدرة على تكوين أورام في الفئران المنقوصة المناعة، مما يجعلها أداة قيّمة للدراسات في الجسم الحي بالإضافة إلى التجارب المختبرية.

فيما يتعلق بالسمات الجزيئية، تم الإبلاغ عن أن خلايا M14 تحمل طفرات في الجينات التي يتم تغييرها بشكل متكرر في الورم الميلانيني بما في ذلك جين BRAF. وعلى وجه التحديد، تحتوي خلايا M14 على طفرة BRAF V600E، والتي تؤدي إلى تنشيط تلقائي لمسار إشارات MAPK/ERK، مما يعزز تكاثر الخلايا وبقائها على قيد الحياة. وهذا يجعل من M14 نموذجًا مهمًا لدراسة العلاجات الموجهة، مثل مثبطات BRAF، المصممة لاستغلال هذه الطفرة. بالإضافة إلى ذلك، استُخدمت خلايا M14 في أبحاث العلاج المناعي بسبب تعبيرها عن العديد من المستضدات المرتبطة بالورم الميلانيني وقابليتها لتعديل الجهاز المناعي.

يجب أن يلاحظ الباحثون الذين يستخدمون خط الخلايا M14 أن هذه الخلايا ليست مناسبة للتطبيقات العلاجية وهي مخصصة فقط للأغراض البحثية، خاصة تلك التي تركز على الفيزيولوجيا المرضية للورم الميلانيني وفحص الأدوية وتطوير استراتيجيات علاجية جديدة. يظل خط الخلايا M14 مورداً رئيسياً لتطوير فهمنا للورم الميلانيني واستكشاف سبل جديدة للعلاج.

الأنسجة
البشرة
المرض
الورم الميلانيني الأميلاني
موقع الانتشار
الأرداف الأيمن، تحت الجلد الأيمن
المرادفات
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية

04المعرّفات

المرجع
M14 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 302163)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1395

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
33
الأصل العرقي
أوروبي