M14

M14 细胞系是一种人类黑色素瘤细胞系，来源于一名成年黑色素瘤患者的转移性皮肤病变。这种细胞系被广泛用于癌症研究，特别是黑色素瘤生物学、肿瘤进展和潜在治疗药物评估方面的研究。M14 细胞具有恶性黑色素瘤的典型特征，包括能在免疫功能低下的小鼠体内形成肿瘤，因此除体外实验外，也是体内研究的重要工具。

在分子特征方面，有报道称 M14 细胞携带黑色素瘤中经常发生变化的基因突变，包括 BRAF 基因。具体来说，M14 细胞携带 BRAF V600E 突变，这种突变导致 MAPK/ERK 信号通路的构成性激活，促进细胞增殖和存活。这使得 M14 细胞成为研究靶向疗法（如 BRAF 抑制剂）的重要模型，而 BRAF 抑制剂正是为利用这种突变而设计的。此外，由于 M14 细胞表达各种黑色素瘤相关抗原，且易受免疫系统调节，因此也被用于免疫疗法研究。

使用 M14 细胞系的研究人员应注意，这些细胞不适合用于治疗，只能用于研究目的，特别是那些侧重于黑色素瘤病理生理学、药物筛选和新治疗策略开发的研究。M14 细胞系仍然是促进我们对黑色素瘤的了解和探索治疗新途径的重要资源。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。