
- Vävnad
- Hud
- Sjukdom
- Amelanotiskt melanom
- Metastaseringsställe
- Höger skinka, hypodermis
- Synonymer
- M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14
Dokument
M14
Cell line · Produktnummer 302163
The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...
Anpassning / Rekommendationer
- M14Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
M14-cellinjen är en human melanomcellinje som härrör från en metastaserande hudlesion hos en vuxen patient med melanom. Denna cellinje används ofta inom cancerforskning, särskilt för studier av melanomets biologi, tumörutveckling och utvärdering av potentiella terapeutiska medel. M14-celler uppvisar egenskaper som är typiska för malignt melanom, inklusive förmågan att bilda tumörer i immunkomprometterade möss, vilket gör dem till ett värdefullt verktyg för in vivo-studier utöver in vitro-experiment.
När det gäller molekylära egenskaper har det rapporterats att M14-celler bär på mutationer i gener som ofta förändras vid melanom, bland annat BRAF-genen. Specifikt har M14-cellerna BRAF V600E-mutationen, som leder till konstitutiv aktivering av MAPK/ERK-signalvägen, vilket främjar cellproliferation och överlevnad. Detta gör M14 till en viktig modell för att studera riktade behandlingar, t.ex. BRAF-hämmare, som är utformade för att utnyttja denna mutation. Dessutom har M14-celler använts i immunterapiforskning på grund av att de uttrycker olika melanomassocierade antigener och är känsliga för immunförsvarsmodulering.
Forskare som använder M14-cellinjen bör notera att dessa celler inte är lämpliga för terapeutiska tillämpningar och endast är avsedda för forskningsändamål, särskilt sådana som fokuserar på patofysiologi för melanom, läkemedelsscreening och utveckling av nya terapeutiska strategier. M14-cellinjen är fortfarande en viktig resurs för att öka vår förståelse av melanom och utforska nya behandlingsmetoder.
- Vävnad
- Hud
- Sjukdom
- Amelanotiskt melanom
- Metastaseringsställe
- Höger skinka, hypodermis
- Synonymer
- M14-MEL
- UCLA-SO-M14
- UCLA SO M14
- UCLA-SO-14
- UCLASO-M14
- Melanoma 14
- M-14
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Fibroblastliknande
04Identifierare
- Källa
- M14 (Cytion katalognummer 302163)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1395
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% värmeinaktiverad FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Donatorns ålder
- 33
- Etnicitet
- Europeiska
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja