M14

Linia komórkowa M14 to ludzka linia komórkowa czerniaka pochodząca z przerzutowej zmiany skórnej u dorosłego pacjenta z czerniakiem. Ta linia komórkowa jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem, w szczególności w badaniach biologii czerniaka, progresji guza i oceny potencjalnych środków terapeutycznych. Komórki M14 wykazują cechy typowe dla czerniaka złośliwego, w tym zdolność do tworzenia guzów u myszy z obniżoną odpornością, co czyni je cennym narzędziem do badań in vivo oprócz eksperymentów in vitro.

Pod względem cech molekularnych, komórki M14 są nosicielami mutacji w genach, które są często zmieniane w czerniaku, w tym w genie BRAF. W szczególności, komórki M14 są nosicielami mutacji BRAF V600E, która prowadzi do konstytutywnej aktywacji szlaku sygnałowego MAPK/ERK, promując proliferację i przeżycie komórek. Sprawia to, że komórki M14 są ważnym modelem do badania terapii celowanych, takich jak inhibitory BRAF, które zostały zaprojektowane w celu wykorzystania tej mutacji. Dodatkowo, komórki M14 zostały wykorzystane w badaniach nad immunoterapią ze względu na ekspresję różnych antygenów związanych z czerniakiem i podatność na modulację układu odpornościowego.

Badacze korzystający z linii komórkowej M14 powinni pamiętać, że komórki te nie nadają się do zastosowań terapeutycznych i są przeznaczone wyłącznie do celów badawczych, w szczególności tych skupiających się na patofizjologii czerniaka, badaniach przesiewowych leków i opracowywaniu nowych strategii terapeutycznych. Linia komórkowa M14 pozostaje kluczowym źródłem wiedzy na temat czerniaka i odkrywania nowych sposobów leczenia.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym