Премини към съдържанието
M14
Тъкан
Кожа
Заболяване
Амеланотичен меланом
Място на метастазите
Десен седалищен мускул, хиподерма
Синоними
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Документи

M14

Cell line · Номер на продукта 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия M14 е човешка меланомна клетъчна линия, получена от метастатична кожна лезия на възрастен пациент с меланом. Тази клетъчна линия се използва широко в изследванията на рака, особено в проучването на биологията на меланома, прогресията на тумора и оценката на потенциални терапевтични средства. Клетките M14 притежават характеристики, типични за злокачествения меланом, включително способността да образуват тумори в имунокомпрометирани мишки, което ги прави ценен инструмент за in vivo изследвания в допълнение към in vitro експериментите.

По отношение на молекулярните характеристики е съобщено, че клетките M14 са носители на мутации в гени, които често се променят при меланома, включително гена BRAF. По-конкретно, клетките M14 притежават мутацията BRAF V600E, която води до конститутивно активиране на MAPK/ERK сигналния път, насърчавайки клетъчната пролиферация и оцеляване. Това превръща M14 във важен модел за изучаване на целеви терапии, като инхибитори на BRAF, които са предназначени да използват тази мутация. Освен това клетките M14 се използват в изследвания в областта на имунотерапията поради експресията на различни антигени, свързани с меланома, и податливостта им на модулация на имунната система.

Изследователите, използващи клетъчната линия M14, трябва да имат предвид, че тези клетки не са подходящи за терапевтични приложения и са предназначени единствено за изследователски цели, особено за такива, насочени към патофизиологията на меланома, скрининг на лекарства и разработване на нови терапевтични стратегии. Клетъчната линия M14 остава ключов ресурс за подобряване на разбирането ни за меланома и за проучване на нови възможности за лечение.

Тъкан
Кожа
Заболяване
Амеланотичен меланом
Място на метастазите
Десен седалищен мускул, хиподерма
Синоними
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти

04Идентификатори

Източник
M14 (каталожен номер 302163 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1395

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% топлинно активиран FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
33
Етническа принадлежност
Европейски