Перейти до вмісту
M14
Тканина
Шкіра
Хвороба
Амеланотична меланома
Місце метастазування
Права сідниця, підшкірна клітковина
Синоніми
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Документи

M14

Cell line · Номер товару 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія М14 - це лінія клітин меланоми людини, отримана з метастатичного ураження шкіри дорослого пацієнта з меланомою. Ця клітинна лінія широко використовується в дослідженнях раку, зокрема у вивченні біології меланоми, прогресії пухлини та оцінці потенційних терапевтичних агентів. Клітини М14 мають характеристики, характерні для злоякісної меланоми, включаючи здатність утворювати пухлини у мишей з ослабленим імунітетом, що робить їх цінним інструментом для досліджень in vivo на додаток до експериментів in vitro.

З точки зору молекулярних особливостей, клітини М14 несуть мутації в генах, які часто змінюються при меланомі, в тому числі в гені BRAF. Зокрема, клітини M14 містять мутацію BRAF V600E, яка призводить до конститутивної активації сигнального шляху MAPK/ERK, що сприяє проліферації та виживанню клітин. Це робить M14 важливою моделлю для вивчення таргетної терапії, наприклад, інгібіторів BRAF, які призначені для використання цієї мутації. Крім того, клітини M14 використовуються в дослідженнях імунотерапії завдяки їх експресії різних меланома-асоційованих антигенів та чутливості до модуляції імунної системи.

Дослідники, які використовують клітинну лінію М14, повинні враховувати, що ці клітини не придатні для терапевтичного застосування і призначені виключно для дослідницьких цілей, зокрема для вивчення патофізіології меланоми, скринінгу лікарських препаратів і розробки нових терапевтичних стратегій. Клітинна лінія М14 залишається ключовим ресурсом для поглиблення нашого розуміння меланоми та пошуку нових шляхів лікування.

Тканина
Шкіра
Хвороба
Амеланотична меланома
Місце метастазування
Права сідниця, підшкірна клітковина
Синоніми
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробластоподібні

04Ідентифікатори

Посилання
M14 (номер за каталогом Cytion 302163)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1395

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% термоінактивованого FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
33
Етнічна приналежність
Європейський