
- Audinys
- Odos
- Liga
- Amelanotinė melanoma
- Metastazių vieta
- Dešinysis sėdmuo, poodis
- Sinonimai
- M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14
Dokumentai
M14
Cell line · Prekės numeris 302163
The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- M14Cell line€430.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
M14 ląstelių linija yra žmogaus melanomos ląstelių linija, gauta iš suaugusio paciento, sergančio melanoma, metastazavusio odos pažeidimo. Ši ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimuose, ypač tiriant melanomos biologiją, naviko progresavimą ir vertinant galimus gydomuosius preparatus. M14 ląstelės pasižymi piktybinei melanomai būdingomis savybėmis, įskaitant gebėjimą formuoti navikus imunokompromituotose pelėse, todėl jos yra vertinga priemonė ne tik in vitro eksperimentams, bet ir in vivo tyrimams.
Kalbant apie molekulines savybes, pranešta, kad M14 ląstelės turi melanomai dažnai pakitusių genų, įskaitant BRAF geną, mutacijų. Konkrečiai M14 ląstelės turi BRAF V600E mutaciją, dėl kurios konstituciškai aktyvuojamas MAPK/ERK signalinis kelias, skatinantis ląstelių proliferaciją ir išgyvenamumą. Dėl to M14 yra svarbus modelis tiksliniams gydymo būdams, pavyzdžiui, BRAF inhibitoriams, skirtiems šiai mutacijai išnaudoti, tirti. Be to, M14 ląstelės buvo naudojamos imunoterapijos tyrimams, nes jose yra įvairių su melanoma susijusių antigenų ir jos yra jautrios imuninės sistemos moduliacijai.
Mokslininkai, naudojantys M14 ląstelių liniją, turėtų atkreipti dėmesį į tai, kad šios ląstelės nėra tinkamos naudoti terapijoje ir yra skirtos tik moksliniams tyrimams, ypač tiems, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama melanomos patofiziologijai, vaistų atrankai ir naujų gydymo strategijų kūrimui. M14 ląstelių linija išlieka svarbiu šaltiniu, padedančiu geriau suprasti melanomą ir ieškoti naujų gydymo būdų.
- Audinys
- Odos
- Liga
- Amelanotinė melanoma
- Metastazių vieta
- Dešinysis sėdmuo, poodis
- Sinonimai
- M14-MEL
- UCLA-SO-M14
- UCLA SO M14
- UCLA-SO-14
- UCLASO-M14
- Melanoma 14
- M-14
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į fibroblastus panašus
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- M14 (Cytion katalogo numeris 302163)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1395
05Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % termiškai inaktyvuoto FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
07Donoras
- Donoro amžius
- 33
- Etninė priklausomybė
- Europos
08Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip