Pereiti prie turinio
M14
Audinys
Odos
Liga
Amelanotinė melanoma
Metastazių vieta
Dešinysis sėdmuo, poodis
Sinonimai
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Dokumentai

M14

Cell line · Prekės numeris 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

M14 ląstelių linija yra žmogaus melanomos ląstelių linija, gauta iš suaugusio paciento, sergančio melanoma, metastazavusio odos pažeidimo. Ši ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimuose, ypač tiriant melanomos biologiją, naviko progresavimą ir vertinant galimus gydomuosius preparatus. M14 ląstelės pasižymi piktybinei melanomai būdingomis savybėmis, įskaitant gebėjimą formuoti navikus imunokompromituotose pelėse, todėl jos yra vertinga priemonė ne tik in vitro eksperimentams, bet ir in vivo tyrimams.

Kalbant apie molekulines savybes, pranešta, kad M14 ląstelės turi melanomai dažnai pakitusių genų, įskaitant BRAF geną, mutacijų. Konkrečiai M14 ląstelės turi BRAF V600E mutaciją, dėl kurios konstituciškai aktyvuojamas MAPK/ERK signalinis kelias, skatinantis ląstelių proliferaciją ir išgyvenamumą. Dėl to M14 yra svarbus modelis tiksliniams gydymo būdams, pavyzdžiui, BRAF inhibitoriams, skirtiems šiai mutacijai išnaudoti, tirti. Be to, M14 ląstelės buvo naudojamos imunoterapijos tyrimams, nes jose yra įvairių su melanoma susijusių antigenų ir jos yra jautrios imuninės sistemos moduliacijai.

Mokslininkai, naudojantys M14 ląstelių liniją, turėtų atkreipti dėmesį į tai, kad šios ląstelės nėra tinkamos naudoti terapijoje ir yra skirtos tik moksliniams tyrimams, ypač tiems, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama melanomos patofiziologijai, vaistų atrankai ir naujų gydymo strategijų kūrimui. M14 ląstelių linija išlieka svarbiu šaltiniu, padedančiu geriau suprasti melanomą ir ieškoti naujų gydymo būdų.

Audinys
Odos
Liga
Amelanotinė melanoma
Metastazių vieta
Dešinysis sėdmuo, poodis
Sinonimai
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
M14 (Cytion katalogo numeris 302163)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % termiškai inaktyvuoto FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
33
Etninė priklausomybė
Europos