Skip to content
M14
Tissue
עור
Disease
מלנומה ללא מלנוציטים
Metastatic site
ישבן ימין, תת-עור
Synonyms
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Documents

M14

Cell line · Product number 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים M14 הוא קו תאים של מלנומה אנושית שמקורו בנגע עורי גרורתי של חולה בוגר הסובל ממלנומה. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקר הסרטן, במיוחד בחקר הביולוגיה של מלנומה, התקדמות הגידול והערכת חומרים טיפוליים פוטנציאליים. תאי M14 מציגים מאפיינים אופייניים למלנומה ממאירה, כולל היכולת ליצור גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, מה שהופך אותם לכלי חשוב למחקרים in vivo בנוסף לניסויים in vitro.

מבחינת המאפיינים המולקולריים, דווח כי תאי M14 נושאים מוטציות בגנים המשתנים לעתים קרובות במלנומה, כולל הגן BRAF. באופן ספציפי, תאי M14 נושאים את המוטציה BRAF V600E, המובילה להפעלה קונסטיטוטבית של מסלול האיתות MAPK/ERK, המקדמת התרבות תאים והישרדות. זה הופך את M14 למודל חשוב לחקר טיפולים ממוקדים, כגון מעכבי BRAF, שנועדו לנצל מוטציה זו. בנוסף, תאי M14 שימשו במחקר אימונותרפיה בשל ביטויים של אנטיגנים שונים הקשורים למלנומה ורגישותם למודולציה של מערכת החיסון.

חוקרים המשתמשים בקו התאים M14 צריכים לשים לב שתאים אלה אינם מתאימים ליישומים טיפוליים ומיועדים אך ורק למטרות מחקר, במיוחד מחקרים המתמקדים בפתופיזיולוגיה של מלנומה, סינון תרופות ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות. קו התאים M14 נותר משאב מרכזי לקידום ההבנה שלנו לגבי מלנומה ולחקר דרכים חדשות לטיפול.

Tissue
עור
Disease
מלנומה ללא מלנוציטים
Metastatic site
ישבן ימין, תת-עור
Synonyms
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט

04Identifiers

Citation
M14 (מספר קטלוגי Cytion 302163)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
33
Ethnicity
אירופאי