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M14
ティッシュ
皮膚
病気
無色素性黒色腫
転移部位
右臀部、皮下
同義語
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

M14

Cell line · 製品番号 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00税・送料別

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01概要

説明

M14細胞株は、成人黒色腫患者の転移性皮膚病変に由来するヒト黒色腫細胞株である。この細胞株はがん研究、特にメラノーマの生物学、腫瘍の進行の研究、潜在的な治療薬の評価に広く用いられている。M14細胞は、免疫不全マウスで腫瘍を形成する能力など、悪性黒色腫に典型的な特徴を示し、in vitro実験に加えてin vivo研究のための貴重なツールとなっている。

分子的特徴に関しては、M14細胞はBRAF遺伝子を含むメラノーマで頻繁に変化する遺伝子に変異を有することが報告されている。具体的には、M14細胞はBRAF V600E変異を保有しており、これはMAPK/ERKシグナル伝達経路の構成的活性化をもたらし、細胞の増殖と生存を促進する。このためM14は、この変異を利用したBRAF阻害剤などの標的治療を研究するための重要なモデルとなっている。さらに、M14細胞は様々な黒色腫関連抗原を発現し、免疫系調節に対する感受性が高いため、免疫療法研究にも利用されている。

M14細胞株を使用する研究者は、これらの細胞は治療用途には適しておらず、研究目的、特に黒色腫の病態生理、薬剤スクリーニング、および新しい治療戦略の開発に焦点を当てた研究のみを目的としていることに留意すべきである。M14細胞株は、黒色腫の理解を進め、治療の新たな道を探るための重要なリソースであり続けている。

ティッシュ
皮膚
病気
無色素性黒色腫
転移部位
右臀部、皮下
同義語
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様

04識別子

引用
M14(サイシオン カタログ番号 302163)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1395

05取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10%熱不活性化FBSを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
33
民族
ヨーロピアン