Tartalomra ugrás
M14
Szövet
Bőr
Betegség
Amelanotikus melanoma
Áttétes hely
Jobb fenék, hypodermis
Szinonimák
M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14

Dokumentumok

M14

Cell line · Termékszám 302163

The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az M14 sejtvonal egy humán melanoma sejtvonal, amely egy felnőtt melanomás beteg metasztatikus bőrelváltozásából származik. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban, különösen a melanoma biológiájának, a tumor progressziójának és a potenciális terápiás szerek értékelésének tanulmányozására. Az M14 sejtek a rosszindulatú melanomára jellemző tulajdonságokkal rendelkeznek, beleértve azt a képességet, hogy immunhiányos egerekben tumorokat képeznek, ami az in vitro kísérletek mellett értékes eszközzé teszi őket az in vivo vizsgálatokhoz.

A molekuláris jellemzőket illetően az M14 sejtek olyan gének mutációit hordozzák, amelyek a melanomában gyakran módosulnak, beleértve a BRAF gént is. Konkrétan az M14 sejtek a BRAF V600E mutációt hordozzák, amely a MAPK/ERK jelátviteli útvonal konstitutív aktiválódásához vezet, elősegítve a sejtek proliferációját és túlélését. Ez teszi az M14 sejtet fontos modellé az olyan célzott terápiák, például a BRAF-gátlók tanulmányozásához, amelyeket e mutáció kihasználására terveztek. Ezenkívül az M14 sejteket az immunterápiás kutatásokban is felhasználták, mivel különböző melanomával kapcsolatos antigéneket fejeznek ki, és érzékenyek az immunrendszer modulációjára.

Az M14 sejtvonalat használó kutatóknak tudomásul kell venniük, hogy ezek a sejtek nem alkalmasak terápiás alkalmazásra, és kizárólag kutatási célokra szolgálnak, különösen a melanoma patofiziológiájára, a gyógyszerek szűrésére és új terápiás stratégiák kifejlesztésére összpontosító kutatások számára. Az M14 sejtvonal továbbra is kulcsfontosságú erőforrás a melanóma jobb megértéséhez és a kezelés új útjainak feltárásához.

Szövet
Bőr
Betegség
Amelanotikus melanoma
Áttétes hely
Jobb fenék, hypodermis
Szinonimák
  • M14-MEL
  • UCLA-SO-M14
  • UCLA SO M14
  • UCLA-SO-14
  • UCLASO-M14
  • Melanoma 14
  • M-14

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű

04Azonosítók

Hivatkozás
M14 (Cytion katalógusszám 302163)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1395

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
33
Etnikai hovatartozás
Európai