
- Szövet
- Bőr
- Betegség
- Amelanotikus melanoma
- Áttétes hely
- Jobb fenék, hypodermis
- Szinonimák
- M14-MEL, UCLA-SO-M14, UCLA SO M14, UCLA-SO-14, UCLASO-M14, Melanoma 14, M-14
Dokumentumok
M14
Cell line · Termékszám 302163
The M14 cell line is a human melanoma cell line derived from a metastatic skin lesion of an adult patient with melanoma. This cell line is widely used in ...
Személyre szabás / Ajánlások
- M14Cell line€430.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
Az M14 sejtvonal egy humán melanoma sejtvonal, amely egy felnőtt melanomás beteg metasztatikus bőrelváltozásából származik. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a rákkutatásban, különösen a melanoma biológiájának, a tumor progressziójának és a potenciális terápiás szerek értékelésének tanulmányozására. Az M14 sejtek a rosszindulatú melanomára jellemző tulajdonságokkal rendelkeznek, beleértve azt a képességet, hogy immunhiányos egerekben tumorokat képeznek, ami az in vitro kísérletek mellett értékes eszközzé teszi őket az in vivo vizsgálatokhoz.
A molekuláris jellemzőket illetően az M14 sejtek olyan gének mutációit hordozzák, amelyek a melanomában gyakran módosulnak, beleértve a BRAF gént is. Konkrétan az M14 sejtek a BRAF V600E mutációt hordozzák, amely a MAPK/ERK jelátviteli útvonal konstitutív aktiválódásához vezet, elősegítve a sejtek proliferációját és túlélését. Ez teszi az M14 sejtet fontos modellé az olyan célzott terápiák, például a BRAF-gátlók tanulmányozásához, amelyeket e mutáció kihasználására terveztek. Ezenkívül az M14 sejteket az immunterápiás kutatásokban is felhasználták, mivel különböző melanomával kapcsolatos antigéneket fejeznek ki, és érzékenyek az immunrendszer modulációjára.
Az M14 sejtvonalat használó kutatóknak tudomásul kell venniük, hogy ezek a sejtek nem alkalmasak terápiás alkalmazásra, és kizárólag kutatási célokra szolgálnak, különösen a melanoma patofiziológiájára, a gyógyszerek szűrésére és új terápiás stratégiák kifejlesztésére összpontosító kutatások számára. Az M14 sejtvonal továbbra is kulcsfontosságú erőforrás a melanóma jobb megértéséhez és a kezelés új útjainak feltárásához.
- Szövet
- Bőr
- Betegség
- Amelanotikus melanoma
- Áttétes hely
- Jobb fenék, hypodermis
- Szinonimák
- M14-MEL
- UCLA-SO-M14
- UCLA SO M14
- UCLA-SO-14
- UCLASO-M14
- Melanoma 14
- M-14
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Fibroblaszt-szerű
04Azonosítók
- Hivatkozás
- M14 (Cytion katalógusszám 302163)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1395
05Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
07Adományozó
- Az adományozó életkora
- 33
- Etnikai hovatartozás
- Európai
08Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen